变性聚丙烯酰胺凝胶电泳点样怎么往上飘
我用的是6*loadingbuffer5ul,PCR产物10ul怎么老往上飘啊，都做了好几回了，到底是怎么回事啊。我做的是分离核酸的胶。10%变性聚丙烯酰胺凝胶。...我用的是6*loading buffer 5ul,PCR产物10ul怎么老往上飘啊，都做了好几回了，到底是怎么回事啊。我做的是分离核酸的胶。10%变性聚丙烯酰胺凝胶。
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分离核酸的胶是琼脂糖胶吧？SDS-PAGE胶不是用来分离蛋白质的吗？6*loading buffer 5ul,PCR产物10ul，那loading buffer加个2微升不就行了？ 还有液体密度，SDS-PAGE胶是浸没在SDS溶液中的，琼脂糖胶是浸没在TAE中的，密度不一样当然会出问题，你再搞搞清楚？
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你加样前先用running buffer把每个上样孔都冲洗一遍，你用的是尿素变性胶吧，我们实验室也跑这个胶，8M的尿素浓度太高了，很容易从胶孔析出，肉眼是看不见的，但是你上样时，样品会因为胶孔里有尿素而沉不下去，这个loading buffer没什么关系，用2X的loading buffer如果胶孔处理干净了样品也不会飘的。
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沉降不够，不知道这个loading buffer的配方是什么？做PAGE胶分离，loading的配方要能够帮助样品沉降。
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