bradyford法测定蛋白质含量的原理是什么?

网友 1

最佳答案

回答者:网友

bradford法测定蛋白质含量,也就是考马斯亮蓝法,其原理是考马斯亮蓝在游离状态下呈棕红色,最大光吸收在488nm; 当它与蛋白质结合后变为蓝色,蛋白质—色素结合物在595nm波长下有最大光吸收。其光吸收值与蛋白质含量成正比,因此可用于蛋白质的定量测定。

蛋白质与考马斯亮蓝结合在2min左右的时间内达到平衡,完成反应十分迅速;其结合物在室温下1h内保持稳定。该法试模洞剂配制简单,操作简便快捷,反应非常灵敏,灵敏度比Lowry法还高4倍,可测定微克级蛋毁码旁白质含量。不利因素主要是特殊蛋来自白的结构,缓冲液组分中有干扰试剂等。

扩展资料:

考马斯亮蓝法该方法用于大多数蛋白质的定量是比较精确的,但不适用于小分子碱性多肽的定量纤橡。如核糖核酸酶或溶菌酶。去污剂的浓度什笔错喜田观异由每评超过0.2%影响测定结果。如TritonX-100、SDS、NP-40等。

由于各种蛋白质中的精氨酸和芳香族氨基酸的含量不同,因此考马斯亮蓝染色法用于不同蛋帝员务究阿威知曲白质测定时有较大的偏差,在制360问答作标准曲线时通常选用 g-球蛋白为标准蛋白质,以减少这方面的偏差。

参考资料来源:

百度百科-考利齐说李素马斯亮蓝法


我来回答