探针有哪些类型?探针标记有哪些方法

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探针有DNA探针和寡核苷酸探针。

探针标记方法有:随机引物标记、切口平移法细翻景间同条八逐粮、末端标记法。

切口平移是切口360问答产生3'羟基和5'磷酸基团,DNA延伸合成3'端,5'端被小片段降解,缺口位点沿着双链向3'端移动,是在体外向DNA分子引入放射性标记核苷酸的技术。

随机引物合成是使寡核苷酸引物与兰环朝行DNA模板结合,在Klenow酶的作用下,合成DNA探针

末端标记法通过末端脱氧核糖核苷酸转移酶催化生灯粮季左扩死烟费标记的dNTP加到单链或双链DNA的3,末端上。



探针合成的注意事项

①合成探针的长短,一般在20~50个核苷酸之间。合成过长成本高,且易出现聚合酶合成错误,杂交时间长,合成太短则特异性下降。

②碱基组成G-C应含40%~60%,差乎权谁府达格边月一种碱基连续重复不超过4个,以免非特异性杂交产生。

③探针自身序列内应无互补区域,以免产生“发夹”结构,影响杂交。

总之,一个好的探针最终要在实践中才能加以确认。


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