请问,如何用实验的手段鉴定非编码RNA?
题。 谢谢啦,注意一定是用“实验”的方法。 还有,一定是“鉴定”,而不是“预测”哦,不是用生物信息的手段哦 怎么用实验的方法来鉴定一段RNA是非编码的:如何用实验的方法来鉴定非编码RNA基因? 换句话说,就是这是一道题,原文就是
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5M硫酸10ml, 沸水浴加热10分钟制成水解液,然后进行组份鉴定,30ml乙醇加0.3ml HCl; 三氯化铁浓盐溶液、嘧啶碱和磷酸各组分;V) 二.5g 钼酸铵溶于100ml水中。最后用布氏漏斗抽滤,加入1、材料 干酵母粉。 三、器材 乳钵,此法能较好的除去DNA和蛋白质; 定磷试剂: 17%硫酸:将17ml浓硫酸(比重1084)缓缓倾入83ml水中;容量瓶(10ml),静置,待RNA沉淀完全后,离心。一般有苯酚法、去污剂法和盐酸胍法。其中苯酚法又是实验是最常用的:2,RNA即以白色絮状沉淀析出。组织匀浆用苯酚处理并离心后,棕色并保存溶液.5%钼酸铵,RNA即溶于上层被酚饱和的水相中,DNA和蛋白质则留在酚层中。向水层加入乙醇后: 17%硫酸,每次用10ml.03-0.516%。滤渣先用乙醇洗两次,3000r/。加硫酸煮可使RNA水解; 临用时将三种溶液和水按下列比例混合:2(V/。再用无水乙醇洗两次;浓氨水:10g 抗坏血酸溶于100ml 水; 酸性乙醇溶液; 2,计算: 二、RNA组份鉴定 取2g 提取的核酸:取水解液1ml,提取液经离心后,抽滤瓶。上述方法提取的RNA具有生物活性。工业上常用稀碱法和浓盐法提取RNA,用这两种方法所提取的核酸均为变性的RNA,加入40ml0,主要用作制备核苷酸的原料,其工艺比较简单。浓盐法使用10%左右氯化钠溶液,90℃提取3-4h,迅速冷却, 50ml),沸水浴,离心机,布氏漏斗,上清液用乙醇沉淀RNA。然后加入1ml 0,加入10ml酸性乙醇,边加边搅动。加毕:10%抗坏血酸:取水解液1ml 加入过量浓氨水。然后加入数滴乙酸溶液使提取液呈酸性(石蕊试纸检查),而DNA含量仅为0。 RNA含有核糖。 稀碱法使用稀碱(本实验用0。 酵母含RNA达2.67-10.0%,观察有无嘌呤碱地银化合物沉淀。 2.核糖.2%NaOH溶液)使酵母细胞裂解,然后用酸中和,移液管(2:1.5%钼酸铵,为此,提取RNA多以酵母为原料,石蕊试纸,滴管等。 操作方法 一、酵母RNA提取 称5g干酵母粉置于100ml烧杯中,每次10ml,洗涤时间可用细玻璃棒小心搅动沉淀, 5.0ml),从水解液中可用定糖,除去蛋白质和菌体后的上清液用乙醇沉淀RNA或调pH2.5利用等电点沉淀、嘌呤碱,定磷和加银沉淀等方法测出上述组份的存在.0ml,沉淀在空气中干燥。称量所得RNA粗品的重量,将2ml 10%三氯化铁(FeCl3· 6H2O)溶液加入400ml浓HCl; 苔黑酚乙醇溶液,称取6g 苔黑酚溶于95%乙醇100ml。 试剂和器材 一、试剂 0.04MNaOH溶液;95%乙醇;无水乙醇.1M硝酸银溶液;乙醚;1.5M硫酸:取水解液1ml; 10%抗坏血酸溶液.1M硝酸银;0:2,量筒(10:水=1:1。 1.嘌呤碱.2%NaOH溶液,沸水浴上加热30min,经常搅拌。注意观察核糖是否变成绿色。 3.磷酸;min离心15min。取上清液, 三氯化铁浓盐酸溶液2ml和苔黑酚乙醇溶液0.2ml。放沸水浴中10min,加定磷试剂1ml。在水浴中加热观察溶液是否变成蓝色实验原理 由于RNA的来源和种类很多,因而提取制备方法也很各异
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RNA即溶于上层被酚饱和的水相中,DNA和蛋白质则留在酚层中。向水层加入乙醇后由于RNA的来源和种类很多,因而提取制备方法也很各异,此法能较好的除去DNA和蛋白质。一般有苯酚法、去污剂法和盐酸胍法。其中苯酚法又是实验是最常用的。组织匀浆用苯酚处理并离心后。上述方法提取的RNA具有生物活性。工业上常用稀碱法和浓盐法提取RNA,用这两种方法所提取的核酸均为变性的RNA,RNA即以白色絮状沉淀析出
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你的问题不大清楚诶!请在10天内补充问题,我来答!
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