加入溶支范切便于待液1的目的主要是将细菌团块重新溶解于缓冲液中;溶液2含有SDS及N负三aOH,前者可将细磁们菌溶解,后者可将DNA变性;溶液3是由醋酸和钾盐组成,前者在于中和碱性,后者则有利于染色体DNA的沉淀。
高pH使质粒DNA和染色体DNA变性,同时沉淀蛋白质。再将pH值调至中性,质粒DNA较小,很容易复性成双链。而染色体DNA较大,不会复性希官否,缠结成网状不溶物质,从而可以通过离心除去。
扩展资料:
尽随春验朝委雨个喜水毛写管碱性溶剂使碱基配对完全破坏,闭环的质粒DNA双链仍息造都不会彼此分离,这因为它们在拓扑学上是相互缠绕的。
只要OH-处理的强度和时间不要太过,当pH值恢复到中性时,DNA双链就会再次形成。在裂解过程中,细菌蛋白质、破裂的细胞壁和变性的染色体DNA会相互缠绕成大型复合物,后比担失草者被十二烷基硫酸盐包盖。
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