内容来自用户:Young1013
灰度值和光密度值在免疫组化定量分析|免疫组化技术现在是很成熟的方法,但是对免疫组化照片的分析并没有一个权威的说法。现在可以查到无数篇应用图像分析来分析免疫组化的剧文献,但几乎没有哪一篇能详细地叙述分析的过程与方法。|首先,免疫组化的样品应该是用DAB对免疫组化产物染色,同时用苏木对细胞核进行复染。镜下观察样品,细胞核被染上了蓝色,胞浆间有黄色(强阳性的地方会呈现棕黄色)。居然经常能看刘作把必始扩主到其他颜色的免疫组化照片,这肯定是样品制作过程中有了差错。|用肉眼观察免疫组化切片的结果只能是定性的,不准确的。使用图像来自分析软件定量地(至少是半定量)对照片测量出一个数值来自然比用肉眼看更准确。|切片上阳性反应物量是由图片上黄色染色的深浅与面积一起表现的。所以最终要测量的就是图片正送故待故边每低卫上黄色部分的累积光密度(IOD),这是个没有单位穿积的相对数值。就是把图片上每个黄色的象素点的强度值全部累加起来得到的值。|IOD除以一个适当360问答的面积,就是一个平均光密度。这个面积可以就是照片的面积,也可以是照片上一个组织区域的面积,或者是有黄色的区域的面积。必须根据切片的实际情况来适当选择。|对于细胞核的免疫组化切片,在细胞核上,由于有蓝色复染,所以需要另一种硫头用易因领每活分析方法。将另作讲解轻重。|