测细胞凋亡,贴壁细胞dapi染色,还需要固定保齐吗

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测细胞凋亡,贴壁细胞dapi染色,最好是固定。

DAPI溶液是半通透性的原权明望福足区却提宁干,不固定的话,细胞染色妒商应福时间得长,染料进入细胞会开微肥独代好组管比较少,所以建议是固定。

DAPI 可以透过完整的细胞膜,它可以用于活细来自胞和固定细胞的染色。


DAPI溶液使用步骤:

固定细剧席日练想过之存至白胞或组织样品,经过固定后,适则宴桥当洗涤除去固孙猛定剂。如果需要进行免疫荧光染色,可先进行免疫荧光染色,染完毕后再进行 DAPI 染色。如果不需要进样逐宁类时搞牛善损严须行其它染色,则直360问答接进行 DAPI 染令全径数斯思方亮模色。

对于贴壁细胞或组织切片,加入少量 D久测制API 染色液,覆盖住样品即可;对于悬浮细胞,至少加入待染色样品祥如体积 3 倍的染色液,混匀。

室温染色 5-10 分钟

吸除 DAPI 染色液,用 纸山攻告逐刑格为娘季田TBST、PBS 或生理盐水洗涤 2-3 次,每次 及突复预线则级三3-5 分钟。

置于荧光显微线马记让迅镜下观察,激发波长 360-400nm。


DAPI溶液注意事项:

DAPI 被普遍认为具有致癌性,操作时应戴手套,并避免交叉污染

DAPI溶液需避光,并尽量避免反复冻融。

荧光染料都存在淬灭问题,建议染色后尽量当天完成检测。


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