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化工问答
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做组织样品来自的western blot的时候,处理样品有什么诀窍吗
网友
1
最佳答案
回答者:网友
做组织样品的western blot的时候
组织样品必须进行研磨、匀浆、超声处理。
蛋白质溶解度会更好,离心要
360问答
充分,膜蛋白需用更剧烈的方法抽提,低丰度膜蛋白可能还要分步抽提(超
速离心)。还有一
点就是组织中的蛋白
穿座拿
酶活性更强,需要
联客独部协号每七
注意抑制蛋白酶的活
性(加入PMSF和蛋白酶
抑制剂cocktail),封闭剂一般5%脱脂奶粉较常用。如果一抗为多克隆抗体,使用BSA也是不错的
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