载体pet28a构建重组质粒,测序来自准确,转至BL21原核表达蛋白,,怎么也诱导不出来?同批次的BL21别人能诱导

37、28℃、20℃摇床,IPTG的浓度设了0.5、1、2、3、4mM的梯度,诱导时间0.5h、1h、2h、4h、5h、7h、过夜,都诱导不出来?诱导挺多次了,都不成功,与诱前、空载都是一样的条带。。。新手上路,亟需高人指点。。。灰常感谢 。。。
网友 1

最佳答案

回答者:网友
1 可能是太弱你看不出来,建议用His抗体做个western 看看是不是有条带而看不出。
2 是江始均施讲不是融解性太差,建议将你的氨基酸序列做个疏水性分析。如果确实如此的话可能要重新构载

我来回答