怎样分离清蛋白,球蛋白,谷蛋白,醇溶蛋白,硬蛋白,组蛋白,精蛋白
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参照蛋白级制备离定纯蛋白我看资料显示都采用osbrone级其离醇溶蛋白机溶剂略同其篇参考:
4.1 原料预处理
苦养粉加入烷室温脱脂12h其间换烷数脱脂苦养粉置于通风橱风干48h脱脂苦荞粉装入具塞试剂瓶置于冰箱4"C保存备用
4.2 苦养麦蛋白质组级制备
清蛋白 取100g脱脂苦荞粉.加入蒸馏水(料水比l:10)室温搅拌提取lh4"C10000r/min离20min收集清液沉淀重复提取离清液合并浓缩冷冻干燥所产品即清蛋白组.
球蛋白 清蛋白提取沉淀加入Imol/L NaCI(料水比1:10)室温搅拌提取lh4"C10000r/min离20min收集清液沉淀重复提取离清液合并于4"C透析(MWCO :8000-10000Da)48h其间换水数离获沉淀沉淀冷冻于燥即球蛋白组
醇溶蛋白 球蛋白提取沉淀加入55%(v/v)丙醇(料水比l:10)室温搅拌提取lh4"010000rlmin离20min收集清液沉淀重复提取离清液合并旋转蒸发浓缩冷冻干燥所产品即醇溶蛋白
谷蛋白 醇溶蛋白提取沉淀加入0.05mol/LNaOH(料水比1:10)室温搅拌提取lh于4"C10000r/min离20min收集清液沉淀重复提取离清液合并加入三氯乙酸至终浓度lOOg/L4℃10000r/min离10min沉淀用冷丙酮洗涤两室温风干所产品即谷蛋白
蛋白质含量测定采用微量Kieldahl定氮定氮系数6.25