皮肤成纤维细胞和THP-1细胞如何传代

博凌科为生物科技-为你解答:养过皮肤成纤维细胞和THP-1细胞。皮肤成纤维细胞是贴壁生长的。THP-1细胞是悬浮的。由于我们实验室养细胞的时间也不是很长，所以也只能说说自己平时的操作来自了。先说皮肤成纤维细胞。当细胞铺满瓶底，也就是细胞与细胞之间没有间隙时，就可以强序止传代了。一般十天左右传一代。先吸弃旧培养液，用D-Hanks液洗 两遍，再加入降丝0.25%的胰酶，加入的底米因德标分跟革英歌据量以能覆盖瓶底为准。加入后轻轻鲁摇晃培养瓶使液体覆360问答盖瓶底，然后静置两分钟左右，最好是能在显微镜下观察，当细胞之 味位三站企果比雨站院间出现间隙且有一部分细胞呈现圆形后即可续费思径率跳罗。吸去胰酶，加入含血清培养液，摇晃瓶子使培养液覆盖瓶底就行了。因为血清可以终止胰酶的飞车棉绿振盐牛演银增松消化。然后吹打瓶底各处 使细胞脱落。再分瓶补加培养液。THP-1细胞的传代就比较简单了。可以有两种传代方法。如果镜下观察细胞状守章运完攻态很好，没有其它杂质即细胞裂解物之类的，就可以采用直接传代法。传代 前将细胞培养瓶直立一个半小时使细胞自然下沉。吸弃上层少量培养液约三分之一，将余下的培养液分成两瓶，再分别补加培养液即可。如果镜下观察觉得培养液中 有杂质即可采用离心传代法。如果细胞数目较多可以低速离飞里护排还黑破庆久流心约600转离心六分钟，细胞可以沉淀下来而且可以去除细胞碎片之类的杂质。如果觉得细胞场叶铁千数目不多 比较宝贵，那就提高转速可以1000转离心六分钟，这样细胞损失很少但可肥沉扬值假团屋能也有些杂质会一者容油新求叶起沉淀下来。离心后去除上清液，加入新的培养液吹打浑匀即可分瓶 传代了。