由于苯胺呈碱性，苯胺在硝化条件（混酸：硫酸+硝酸）下首相会发生酸碱反应，即苯胺的胺基会被质子化，该基团被质子化后会从两方面影响消化反应：
（1）电子效应： 由于氨基被质子化，其将从相邻的苯环上拉取电子，是苯环上的电子云密度降低，导致亲电芳香取代反应比原来的苯胺难，即硝化反应变得困难。
（2）定位效应：由于氨基被质子化后，取代基的定位效应（胺基是供电子基团，邻对位定位基）也由原来的邻对位定位基转换为间位定位基（胺基被质子化，吸电子基团，间位定位基）。
故在制备对硝基苯胺时，要将氨基保护，即用乙酰基保护，这样既保留的氨基的供电效应，也保留的氨基的定位效应。
