steponeplus荧光定量pcr仪ct值没有

steponeplus荧光定量pcr仪ct值没有的原因如下。
1、循环数不够（一般不超过45循环，不仅背景值提高，定量也不准）。
2、PCR程序设置错误，检测荧光信号的步骤有误，一般SG法采用72℃延伸时采集，TaqMan法则一般在退火结束时或延伸时采集信号，另外荧光来自核码耐采集是否选中。
3抗边息、引物或探针降解，可通过PAGE电泳检测引物和探针是否降解改春。
4、模板量可能降解或上样量不足（不超过500ng，根据试剂盒说明书即可），对未知浓度的样本应从系360问答列稀释样本的最高浓度做起，如果发生模板降解，应考虑样本模出磁掘准备中杂质的引入及反复冻融的情况，建议将模板样本小量分装储备，避免反复冻融。
5、引星算局物探针是否合适（尤其是引物跨越内含子，以确保扩增基因组DNA，上下游引物Tm值超过4℃以上也会影响扩增）。