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挥发性盐基氮(TVB-N)指动物性食品由于酶和细菌的作用,在腐败过程中,使蛋白质分解而产生氨以及胺类等碱性含氮物质。此类物质具有挥发性,其含量越高,表明氨基酸被破坏的越多,特别是蛋氨酸和酪氨酸,因此营养价值大受影响。 挥发性盐基氮(TVB-N)的测定 1. 半微量定氮法 (1)原理:蛋白质在酶和细菌的作用下分解后产生碱性含氮物质,有氨、伯胺、仲胺等,此类物质具有挥发性,可在碱性溶液中被蒸馏出来,用标准酸滴定,计算含量。 (2)试剂 ①氧化镁混悬液 ②2%硼酸溶液(吸收液) ③0.2%甲基红乙醇液 ④0.1%亚甲蓝水溶液 临用时将③④等量混合为混合指示液 ⑤0.0100N盐酸标准溶液或0.0100N 硫酸标准溶液 (3)仪器 ①半微量定氮装置:Markhan氏式 ②微量滴定管:最小分度0.01ml (4)操作方法 ①样液的制备:将样品除去脂肪、骨头及筋腱后,切碎搅匀,称取10g于锥形瓶中,加100ml水,不时振摇,浸渍30min后过滤,滤液置于冰箱中备用。 ②测定:预先将盛有10ml吸收液并加有5-6滴混合指示液的锥形瓶置于冷凝管下端,并使其下端插入锥形瓶内吸收的液面下,精密吸取5ml上述样品滤液于蒸馏器反应室内,加5ml 1%氧化镁混悬液,迅速盖塞,并加水以防漏气,通入蒸汽,待蒸汽充满蒸馏器内时即关闭蒸汽出口管,由冷并行管出现第一滴冷凝水开始计时,蒸馏5min即停止,吸收液用0.0100N盐酸标准溶液或0.0100N硫酸标准溶液滴定,终点呈蓝紫色。同时做试剂空白试验。 (5)计算 (V1-V2)×N1×14 X1= ------------------------- ×100 m1×5/100 式中:X1——样品中挥发性盐基氮的含量,mg/100g V1——测定用样液消耗盐酸或硫酸标准溶液体积,ml V2——试剂空白消耗盐酸或硫酸标准溶液体积,ml N1——盐酸或硫酸标准溶液的摩尔浓度,mol/L m1——样品质量,g 14——1N盐酸或硫酸标准溶液1ml相当氮的毫克数 2. 微量扩散法 (1)原理:挥发性含氮物质在碱性溶液中释出,在扩散皿中于37℃时挥发后吸收于吸收液中,用标准酸滴定,计算含量。 (2)试剂 ①饱和碳酸钾溶液:称取50g碳酸钾,加50ml水,微加热助溶,使用时取上清液。 ②水溶性胶:称取10g阿拉伯胶,加10ml水,再加5ml甘油及5g无水碳酸钾(或无水碳酸钠),研匀。 ③吸收液:混合指示液、0.0100N盐酸或硫酸标准溶液,与半微量定氮法相同。 (3)仪器 ①扩散皿(标准型):玻璃质,内外室总直径61mm,内室直径35mm;外室深度10mm,内室深度5mm;外室壁存3mm,内室壁存2.5mm,回壁纱厚玻璃盖,如图1-1所示,其他型号亦可用。 ②微量滴定管:最小分度0.01ml。
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