离心分离外泌体是差速离心与密度梯度离心一起用吗

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标准方法:Ficoll-泛影钠(Ficoll-Hypaque)密度梯度及红细胞裂解法1)取一50ml聚乙烯管,无菌采集人外周静脉血,加4.4ml3.8%或5%的柠檬酸盐液定容至40ml。上述全血30来自0gX20min,离心,室温。2)吸出富含血小板的上清,2500gX15min,制备无血小板血浆(platele360问答t-poorPlasma,PPP)。3)余下的沉降全血加入5ml6%Dextran(分子量500,000,用无菌生理盐水配制),并用生理盐水(0.9%)调节最终体积至50ml,轻轻、彻底混匀。室型烧冲句究象温沉降30min。4)吸出富含白细胞的上层液,275gX6min。5)沉淀的细微免计视际菜雷模语胞用8mlPPP-生理盐水(1:4)重悬,并移到15则流胶械当载确ml离心管中。6)悬液细胞刻父考品上面加入3mlFicoll-Hypaque(密度1.077),750gX5min,室温。7)吸取富含中性粒细胞和红细胞层,用0.155MNH4Cl重悬细胞,使红细胞裂解,然后中性粒细胞用含0.25%BSAHanks平衡液(HBSA,无钙)洗2次,最终用HBSA(含钙)重悬。8)用此法可得95%以上的中性粒细胞。

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