怎么来自对毕赤酵母菌进行菌落pcr

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用摇的菌液,试剂盒提取酵母菌的DNA后,再取0.5-1ul做验证,这样成功几率会比较高。因复效磁杆集立响敌宗传为菌液PCR的话,模板的量是无法控制的。模板浓度太大的话,也会导传波日某计妒首风零致无法获得阳性条带。
1.用灭菌牙签挑单据用动克隆到10ul无菌去水中;
2.加5ul(5u /ul)的溶细胞酶(推荐SIGMA的);
3.37度水浴半小时;
4.-80度静置15分钟;
5.沸水中煮沸5分钟;
6.12000RPM离办火司心5分钟;
7.取上生夜清0.5-1ul到25ulPCR反应体系

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