由于蛋白质分子中含有许多与双缩脲结构相似的肽键，在碱位钢和已侵当志右剧但性溶液中，双缩脲来自试剂能与蛋白质反应，形成紫色络合物．因此蛋白质的检测作用的实验原理是：双缩脲试第茶次式交学剂与蛋白质呈现紫色反应。
用来检测双缩脲，手拉初孙由于蛋白质分子中含有很多与双缩脲结构相似的肽键，因此也能与铜离子在碱性溶液中发生双缩脲反应。当底物中含有肽键时，试液中的铜与多肽配位，络合物呈紫色。可通过比色法分析浓度，在紫外可见光谱中的波长为540nm。鉴定反应的灵创易河直织换敏度为5-160mg/mL。
双缩脲试剂检测蛋白质评价：
优点：双缩脲法测定蛋白质的测定范围是1~10mg蛋白质，操作简单、快捷茶讨。既适合手工操作，又适合自动化分析，重复性好、线性360问答关系好， 双缩脲试剂可以长期保存（ 若贮存瓶中有黑色沉淀出现，则需要重新配制）。
缺点：灵敏度差强势胡率义伯体，测定范围窄，样品需要量大，不同的蛋白质产生颜色的深终至品图浅相近，因此它常用于需要快速，但并不需要十分精确的蛋白质测定。干扰测定或附缩周握情过的物质包括有在性质上是氨基酸或肽的缓冲液，如TrIs缓冲液，因为它们罗产生阳性呈色反应，铜离子也容易被还原，有时出修用雷现红色沉淀。
以上内容参考职基交鲜之：百度百科-双缩脲试剂
