running buffer 里的Glycine 和Tris Base是起什么作用?

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甘氨酸作为氨基酸,是两性分子,在不同pH情况下解离程度不同。这样由于浓缩胶和分离胶的pH的差别,导致在两者中甘氨酸根含量不同,形成不同强度的电场,从而达到浓缩/分离的目的。 Tris-HCL是缓冲体系,主要用于维持pH稳定。因为胶中也含有Tris,所以采用成分相似的缓冲液可以保持相对稳定。 running buffer里还有个SDS,可以消除不同蛋白之间的电荷和结构差异,使蛋白的依照大小分离。

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