质粒由那些结构组成

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1.概念:质粒是存在于细菌染色质之外的具有自主复制能力的双链环状DNA分子。
    用作克隆载体的来自质粒应具备以下条件:360问答①分子量较小,在细胞中有较多的拷贝数。②松弛型。③具有一个以上的遗传标志。④具有数个或一个单一的酶切位点
2.常用质粒的结构组今期察牛
   (1)最常用的pBR322:大小,4362bp,Mr 2.7×106;松弛型复制;含有两个抗性基因(ampr、tetr),营巴划缺未亲攻国施两个抗性基因有独特的插入DNA片段的克隆位点,从而使耐药基因失活,在另一个抗生素存在下进行选择性培养,使转化的细胞生长。例如,若克隆问质促旧究在pBR322的PstI切点,转化大肠杆菌中的质粒具有抗四环素能力,而失去了抗氨苄青霉素的能力。
(2)pUC质粒:pUC质粒兼有M13和pBR质粒的许多特点,使用式支油室齐害使久学起来更为方便。这些小的质粒(2.7kb)系列含有pBR322抗氨苄青霉素基因,pBR322复制原点和大肠杆菌lacZ基因,在l也督站画他从ac区内有由独特限制突笑洋句位列物湖增杂烟酶识别点组成的多接头围结攻孔径变云兰还因演顺序。pUC质粒属于“松弛过局从长土一型”质粒,可在氯霉素存在下扩增。当DNA片段被克隆到pUC的lac区时,lac基因就失活。将这些质粒转化到lac—大肠杆菌吸学东钢盾尽措义万鸡中,在IPTG和X-gal存在下培养,会得到白色或清亮的克滑困对海隆。不含插入物的pUC质粒转化同样的细胞就能产生蓝色克隆。pUC质粒系列可在克隆区构建内切或阻错酶位点顺序相反的一对载体,这种载体对于一个有不对称末端插入物的测序从两端都可以进行。

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