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细胞周期同步化
在细胞培养过程中,细胞多处
般具顺谈王光沉冷景断马于不同的细胞周期
时相中,其中有少数细胞在进行有丝分裂
面冲时罪顾延品活动,其余细胞分别处于
G1、S和G2各期。不同时相的细胞对药物干预存
在不同反应,会影响实验的重复性,因此,需要获得周期一致性的细胞。利用细
派院胞同步化技术可使细胞大量的处于同一细胞时期,并可获
得该时期大量的物质,如细胞中期时的染色体。细胞周期
同步化(synchronization)是指为了研究某一时相细胞的
晚难般代谢、增殖、基因表达或凋亡,
借助某种自然或人为的实验手段,使细胞群体中处于细胞周期不同时相的细胞停留在同一时相( 除了G0期的细胞)的现
象。细胞同步化本质上包括用一定的方法获得一定数量的同步化细
基承培优胞群和使细胞进入同步化生长
不乐若烈止货看治真商的两层含义。
DNA 合成
抑制法是通过抑制DNA合成将细胞同步于同一时期的方法。高浓度TdR(胸腺嘧啶核
底死苷)双阻断法是目前常用的抑制
DNA 合成的同步化方法。它可逆地抑制DNA 合
被停谓简督待成,而不影响其他时期细胞的转运,最终可将细胞群阻断
在S 期或G1 /S 交界处。其原理是: TdR是细胞DNA 合成不可缺少的前体,但向培养基中加入过量TdR,可形成过量
侵查首的三磷酸腺苷,后者能反馈抑制其他核苷酸的
磷酸化,从而抑制DNA 合成。它将细胞同步于G1 /S
期交界处,同步化程度高,适用于任何培养体系经过同步化之后的细胞可以通过
Hela2.试剂:0.25%胰蛋白酶液、无血清细胞培养液、DAPI试剂、Hank’s液、2mm
ol/L