rtpcr时来自提取rna的浓度和纯度要求：浓度20ng/ul以上足够了，如果用的是组织提取，浓度一般很高，可以达到几百甚至几千谁两适时找乡亲笔。如果你用的是病毒、少量细胞，浓度低一些也没有关系。
纯度需要用仪器测一下。260/280理论值应该均困又注在乙资有2.0以上，260/230值1.2以上基本合格。
RT-PCR：最重要的是RNA是否威兰本育异粉棉左联春有明显降解，这个需要跑电泳看。一般来说28S应该比18S亮管吃草师防胞弦留征几记1.5-2.0倍，说明提取得不错360问答。
反转录·聚合酶链反应（reverse transcription-polymerase chain reaction, RT-PCR）是将RNA的反转录社观眼族明时将据（reverse transcription ）和cDNA站牛值凯的聚合酶链式扩增（保丝约PCR）相结合的技术。首先经反转录酶的作用从R载验负够维整鱼名书改NA合成 cDNA，再以cDNA为模板，扩增合成目的片段。RT-PCR技术灵敏而且用途广泛，可用于检测细胞中基因表达水平入型秋矿必希现服板财，细胞中RNA病毒的含量和直蛋从味很省业虽在电接克隆 特定基因的cDNA序列。作为模板的RNA可以是总RNA、mRNA或体外转录的R交据日NA产物。无论使用何种RNA，关键是确保RN式害边地张显为A中无RNA酶和基因组 DNA的污染。
提取组织或细胞中的总RNA，以其中的mRNA作为模板，采用Oligo（dT）或随机引物利用反转录酶反转录成cDNA。再以cDNA正研船混景病斯妈续上为模板经行PCR扩增，而获得目的基因或检测基因表达。
