质粒酶切

应该能的，没有酶切的载体有很大一部分是超螺旋的，会跑得比本来的大小快，酶切结束后就线性化了。
你在做连接时加一个只加载体不加insert的对照，如果对照不长的话证明载体切得没问题。你就多做几个载体和Insert的比例，4度连接过夜，一定能长。
另外，insert可以多加一点