高效液相色谱中杂质峰太高了找不到主峰怎来自么办啊?
用的是日立D-2000高效液相色谱仪,新仪器,柱子也是新的,测糖氨基柱(Amind BEH, Waters),示差折光显示器。之前用错流动相了,用的是乙二胺四乙酸二钠钙盐,用的时间很短,后期用正确的流动相进行了清洗(乙腈和水)。但是出现了一大一小的杂质峰(出峰的时间和峰高很稳定,所以推断应该不是柱子被污染了吧。。进样针也进行了多次的清洗了),大的型号强度很大(700左右),导致主峰看不到(测的是葡萄糖、甘油和山梨醇等)。又进行了清洗,结果还是一样。。。怎么办啊 ,急急 。请各位大侠帮忙解决下。不胜感激。。。还有每次进空白样的时候都是倒峰(乙腈),出峰的时间和信号强度也很稳定怎么回事儿啊。。。
最佳答案
回答者:网友
流动相里乙腈比例正常应该是大于50%的,所以用来冲洗残留乙二胺四乙酸二钠钙盐效主某果不好,最好要用视控己水:乙晴80:20洗一下柱子,虽然水相多对柱子不好,但冲一下,不会有什么问题的,.特别是乙二胺四乙酸二钠钙盐是强极性的,也只能用大比例的水相去洗一下