关于液相色谱法纯化蛋白质

我想知道凝胶过滤色谱、离子交换色谱、亲和色谱、疏水色谱,这四种色谱相比,它们各自的优缺点,还有各自适合分离纯化什么蛋白?答得好追加分数!... 我想知道凝胶过滤色谱、离子交换色谱、亲和色谱、疏水色谱,这四种色谱相比,它们各自的优缺点,还有各自适合分离纯化什么蛋白?答得好追加分数! 展开
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四种色谱相比较的话,就看你是纯化什么性质的蛋白质,根据蛋白质与杂质之间的的性质来决定选择哪种层析技术。
凝胶:上样量为柱体积的0.5-1%,不要超过2%,是物理方法,填料无吸附作用。要杂质与蛋白质分子量相差较大时才能有效分开。
离子交换:通过蛋白的所带电荷不同来纯化的,参考等电点来控制buffer的pH,洗脱过程是低浓度到高浓度,也就是说离子强度增加,蛋白电荷小的就先被洗脱下来。
亲和:是特异来自性吸附,使蛋白带上标签,能结合360问答到填料位点上,通过争夺结合位点来洗脱。
疏水:是从高盐至低盐,是看蛋白质与杂志的疏水性来志效根出年难点或根洗脱。
四大层析方法各有优缺四呼附尔批点,但是只要能纯化出目标蛋白就是好的纯化方法
建议你看下《蛋白质纯化手册》!

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