高效液相色谱法来自与气相色谱法哪个应用广，为什么？

高效液相色谱经典色谱基础引用气相色谱理论技术流相改高压输送（高输送压力达4.9??107Pa）;色谱柱特殊用粒径填料填充使柱效高于经典液相色谱（每米塔板数达几万或几十万）；同柱连高灵敏度检测器流物进行连续检测
特点

1．高压：液相色谱液体流相（矿派正称载液）液体流经色谱柱受阻力较迅速通色谱柱必须载液施加高压般达150～350×105Pa
2. 高速：流相柱内流速较经典色谱快般达1～10ml/min高效液相色谱所需析间较经典液相色谱少般少于 1h
3. 高效：外毫乎想要近研究许新型固定相使离效率提高
4.高灵敏度：高效液相色谱已广泛采用高灵敏度检测器进步提高析灵敏度荧光检测器灵敏度达10-11g另外用量般几微升
5妈料喜责体.适应范围宽：气相色谱与高效液相色谱比较：气相色谱虽具离能力灵敏度高析速度快操作便等优点受技术条件限制沸点太高物质或热稳定性差物质都难于应用气相色谱进行析高效怕紧友调本称液相色谱要求试能制溶液需要气化受试挥发性限制于高沸点、热稳定性差、相量（于 400 ）机物（些物质几矛似超验印脱再尔乎占机物总数 75% ～ 80% ）原则都应用高效液相色谱进行离、析 据统计已知化合物能用气情烧苦火必机套机庆滑相色谱析约占20%能用液相色谱析约占70～80%

高效液相色谱按其固定相性质高效凝胶色谱、疏水性高香实并员效液相色谱、反相高效液相色谱、高效离交换液相色谱、高效亲液相色谱及呀州径况攻火门高效聚焦液相色谱等类型用同类型高效液相色谱离或析各种化合物原理基本与相应普通液相层析原理相似其同处高效液相色谱灵敏、快速、辨率高、染太独汉现娘重复性且须色谱仪进行
高效液相色谱主要类型及其离原理
根据离机制同高效液相色谱述几种主要类型：

1 ．液 — 液配色谱(L岁掉站正良聚肥令速句系iquid-liquid Partition Chromatography)及化键合相色谱(Chemically Bonded Phase Chromatograph安深样y)

流相固定相都液体流相与固定相间应互相溶（极性同避免固定液流失）明显界面试进入色谱柱溶质两相间进行配达平衡服于式：

式cs—溶质固定相浓度；cm--溶质流相浓度； Vs—事固定相体积；Vm—流相体积LLPC与GPC相似处即离顺序取决于KK组保留值；同处GPC流相K影响LLPC流相K影响较

a. 相液 — 液配色谱(Norm都赵良口防英八顶凯突al Phase liquid Chromatography): 流相极性于固定液极性

b. 反相液 — 液配色谱(Reverse Phase liquid Chromatography): 流相极性于固定液极性

c. 液 — 液配色谱缺点：尽管流相与固定相极性要求完全同固定吗千度斯友液流相仍微量溶解；流相通色谱柱机械冲击力造固定液流失世纪70代末发展化键合固定相（见）克服述缺点现应用布广泛（70~80%）

2 ．困小责甲亮和学够液 — 固色谱

流相液体固定相吸附剂（硅胶、氧化铝等）根据物质吸附作用同进十宗广阿跳优限府守耐行离其作用机制：试进入色谱柱溶质 (X) 溶剂(S)吸附剂表面性发竞争吸附（未进所吸附剂性吸附S）表示：

Xm + nSa ====== Xa + nSm

式：Xm--流相溶质；Sa--固定相溶剂；Xa--固定相溶质；Sm--流相溶剂

吸附竞争反应达平衡：

K=[Xa][Sm]/[Xm][Sa]

式：K吸附平衡数[讨论：K越保留值越]

3 ．离交换色谱(Ion-exchange Chromatography)

IEC离交换剂作固定相IEC基于离交换树脂电离离与流相具相同电荷溶质离进行逆交换依据些离交换剂具同亲力离

阴离交换剂例其交换程表示：

X-(溶剂) + (树脂-R4N+Cl-)=== (树脂-R4N+ X-) + Cl- (溶剂)

交换达平衡：

KX=[-R4N+ X-][ Cl-]/[-R4N+Cl-][ X-]

配系数：

DX=[-R4N+ X-]/[X-]= KX [-R4N+Cl-]/[Cl-]

[讨论：DX与保留值关系]

凡溶剂能够电离物质通都用离交换色谱进行离

4 ．离色谱(Ion Pair Chromatography)

离色谱种 ( 或种 ) 与溶质电荷相反离 ( 称离或反离 ) 加流相或固定相使其与溶质离结合形疏水型离化合物控制溶质离保留行其原理用式表示：

X+水相 + Y-水相 === X+Y-机相

式：X+水相--流相待离机离（阳离）；Y-水相--流相带相反电荷离（氢氧化四丁基铵、氢氧化十六烷基三甲铵等）；X+Y---形离化合物

达平衡：

KXY = [X+Y-]机相/[ X+]水相[Y-]水相

根据定义配系数：

DX= [X+Y-]机相/[ X+]水相= KXY [Y-]水相

[讨论：DX与保留值关系]

离色谱(特别反相)发解决往难离混合物离问题诸酸、碱离、非离混合物特别些化试核酸、核苷、物碱及药物等离

5 ．离色谱(Ion Chromatography)

用离交换树脂固定相电解质溶液流相电导检测器通用检测器消除流相强电解质背景离电导检测器干扰设置抑制柱试组离柱抑制柱反应原理与离交换色谱相同

阴离交换树脂（R-OH）作固定相离阴离（Br-）例待测阴离Br-随流相（NaOH）进入色谱柱发交换反应（洗脱反应交换反应逆程）：

抑制柱发反应：

R-H+ + Na+OH- === R-Na+ + H2O

R-H+ + Na+Br- === R-Na+ + H+Br-

见通抑制柱洗脱液转变电导值水消除本底电导影响；试阴离Br-则转化相应酸H+Br-用电导灵敏检测

离色谱溶液阴离析佳用于阳离析
6 ．空间排阻色谱(Steric Exclusion Chromatography)

空间排阻色谱凝胶 (gel) 固定相类似于筛作用凝胶孔径比筛要般数纳米数百纳米溶质两相间靠其相互作用力同进行离按进行离离与凝胶孔径布溶质流力体积或关试进入色谱柱随流相凝胶外部间隙及孔穴旁流试些太能进入胶孔受排阻直接通柱首先色谱图现些进入所胶孔并渗透颗粒些组柱保留值色谱图现

气相色谱（gas chromatography 简称GC）色谱种色谱两相相流相另相固定相用液体作流相叫液相色谱用气体作流相叫气相色谱
　　气相色谱由于所用固定相同两种用固体吸附剂作固定相叫气固色谱用涂固定液担体作固定相叫气液色谱
　　按色谱离原理气相色谱亦吸附色谱配色谱两类气固色谱固定相吸附剂气固色谱属于吸附色谱气液色谱属于配色谱
　　按色谱操作形式气相色谱属于柱色谱根据所使用色谱柱粗细同般填充柱毛细管柱两类般填充柱固定相装根玻璃或金属管管内径2～6mm毛细管柱则空毛细管柱填充毛细管柱两种空毛细管柱固定液直接涂内径0.1～0.5mm玻璃或金属毛细管内壁填充毛细管柱近几才发展起某些孔性固体颗粒装入厚壁玻管加热拉制毛细管般内径0.25～0.5mm

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