如何验证real time pcr体系稳定性

1）MgCl2的浓度：在PCR反应中，MgCl2的浓度对酶的活性是至关重要的，不仅如此，合适的MgCl2的浓度还能在反应中得到较员相显四检独居章哪绿础低的Cp(crossin边gpoint)值（指PCR达到指数扩增期时，产生一定的荧光高于背景并为仪器所识别时的难众内循环数），较高的荧光信号强度以及良好的曲线峰值。所以对其的浓度选择应究燃边在妈比各慎重。一般来说，对以DNA或cDNA为模板的PCR反应，应选择2－5mM浓度的MgCl2，对以mRNA为模板的RT－PCR而言，则应选择的浓度为4－8mM。