ALPCO小鼠胰岛素ELISA用于定量测定小鼠血清和血浆中的胰岛素。仅供研究使用。不用于诊断程序。

艾美捷小鼠胰岛素ELISA试剂盒（ALP-80-INSMS-E01）检测原理：

ALPCO小鼠胰岛素ELISA是一种夹心型免疫测定法。96孔微孔板上涂有胰岛素特异性单克隆抗体。将标准品、对照品和样品与共轭物一起加入微孔板孔中。然后将微孔板在室温下在微孔板振荡器上以700-900rpm的速度孵育。第一次孵育完成后，用洗涤缓冲液洗涤细胞并吸干。加入TMB底物，在室温下在微孔板振荡器上以700-900rpm第二次孵育微孔板。第二次孵育完成后，加入终止溶液，用分光光度计在450nm处测量光密度（OD）。产生的颜色强度与样品中胰岛素的量成正比。

所需材料：

用于分配高达100 µL的精密移液管（带一次性吸头）

用于分配高达100 µL的可重复使用或多通道移液器

用于试剂准备的量筒和移液管

用于试剂准备的蒸馏水或去离子水

微孔板洗涤器或洗涤瓶

能够达到700-900 rpm的微孔板振荡器

带有450 nm滤光片的微孔板读取器

用于样本准备的涡旋混合器

注意事项：

1. 此试剂盒中包含的人血液制品已检测HIV（人类免疫缺陷病毒）、HBV（乙型肝炎病毒）和HCV（丙型肝炎病毒）的存在。这些病毒的检测方法不能保证病毒的完全不存在；因此，所有试剂应被视为潜在的感染源。处理和处置应遵循所有适当的国家和地方法规，以处理潜在的生物危害材料。

2. 所有来自动物来源的材料均为BSE阴性。然而，所有材料应被视为潜在的感染源。

3. 避免直接与皮肤接触。

4. 本产品不可内服。

5. 使用本产品时，避免进食、饮水或吸烟。

6. 不要用嘴吸取任何试剂。

7. 此试剂盒中的试剂是特定批次的，不得替换。

8. 不要使用超过有效期的试剂。

9. 不建议更改测试程序，可能会影响测试结果。

储存条件：

试剂盒应存放在2-8°C。试剂盒在盒标签上的有效期前是稳定的。

小鼠胰岛素ELISA试剂盒样本处理：

血清和血浆样本适用于此测定。不需要稀释或处理样本。然而，如果样本的胰岛素浓度高于最高标准，应将样本稀释在零标准中，并重复分析。建议1）在使用前彻底涡旋每个样本，2）执行移液动作时不要停顿。样本可以在2-8°C下储存24小时，然后在此测定中分析。对于更长时间的储存，建议在≤ -20°C下储存。避免反复冻融循环。

结果计算：

从标准品构建标准曲线。将零标准作为曲线的一部分绘制。建议使用软件程序来计算标准曲线并确定样本的浓度。ALPCO小鼠胰岛素ELISA是一种配体结合测定法，其响应与分析物浓度呈S形关系。目前接受的此类曲线的参考模型使用5参数逻辑（pl）拟合，因为该模型在更大范围内优化了准确性和精确性。尽管三次样条和其他模型是可接受的方法，但它们通常在可检测范围的低端和高端显示出较低的测定内准确性和精确性。

在下面的示例中，使用了5参数曲线拟合，以最大化低浓度样本的准确性和精确性。然而，由于个别实验室条件的影响，所有模型在可检测范围的最低和最高端的准确性和精确性都是有限的。因此，在解释分析物响应变得非线性的结果时，应始终谨慎。不建议将样本浓度值外推到标准浓度值的范围之外。

典型标准曲线：

以下结果仅供演示之用，不能替代实际测定中获得的数据。每次测定运行和测试的板都必须进行标准曲线的绘制。

小鼠胰岛素ELISA试剂盒文献参考：

Finlay JWA, Dillard RF. Appropriate Calibration Curve Fitting in Ligand Binding Assays. AAPS Journal. 2007; 9(2): E260-E267.