名称:Fluo-4 AM 
品牌: Medlife
CAS号:273221-67-3
货号:PL13148
规格:100μg/价格:¥2410.00
链接:http://www.med-life.cn/product/1289527.html

在神经信号传导、肌肉收缩、免疫激活等生命活动中，钙离子（Ca²⁺）如同细胞内的“信号开关”，精准调控着生理功能的每一步。而Fluo-4 AM，这一基于Fluo-3升级改造的绿色荧光钙探针，凭借其高灵敏度、细胞渗透性和实时监测能力，已成为科学家解析细胞钙信号的“首选工具”。

一、技术革新：从Fluo-3到Fluo-4 AM的突破

Fluo-4 AM是Fluo-3的衍生物，其核心改进在于将分子结构中的氯原子（Cl）替换为氟原子（F）。这一微小调整带来三大优势：

激发波长优化：激发波长从Fluo-3的506 nm缩短至494 nm，更适配氩离子激光器（488 nm），显著提升荧光信号强度；
荧光增强：与Ca²⁺结合后，荧光强度增强60-100倍，远超传统探针，可精准捕捉细胞内钙浓度的微小波动；
细胞渗透性：通过添加乙酰氧基甲酯（AM）基团，Fluo-4 AM转化为脂溶性分子，轻松穿透细胞膜，进入细胞后被酯酶水解为Fluo-4，实现细胞内特异性积累。

二、科研应用：从神经元到药物筛选的全场景覆盖

Fluo-4 AM的“绿色荧光”已渗透至生命科学的多个领域，成为研究细胞钙信号的“万能钥匙”：

1. 神经科学：解码神经信号的“钙瞬变”

在神经元中，动作电位触发钙离子内流，引发神经递质释放。Fluo-4 AM可实时监测这一过程：

实验案例：研究者利用Fluo-4 AM标记小鼠海马体神经元，发现谷氨酸刺激后，细胞内钙浓度在毫秒级时间内飙升，揭示了突触传递的钙依赖机制。
技术优势：相比传统探针（如Fura-2），Fluo-4 AM无需双波长激发，简化操作流程，适配共聚焦显微镜、流式细胞仪等多平台检测。
2. 肌肉生理：追踪心肌收缩的“钙信号”

心肌细胞的收缩与舒张由钙离子浓度周期性变化驱动。Fluo-4 AM可动态记录这一过程：

实验案例：在离体心肌细胞中，Fluo-4 AM显示电刺激后钙浓度迅速上升，触发收缩，随后快速下降，揭示钙调控的“快进快出”特性。
临床意义：为心律失常、心力衰竭等疾病的钙信号异常研究提供关键技术支撑。
3. 免疫学：捕捉免疫细胞活化的“钙波动”

T细胞、巨噬细胞等免疫细胞在活化时，胞内钙浓度显著升高。Fluo-4 AM可量化这一过程：

实验案例：研究者用Fluo-4 AM标记T细胞，发现抗原呈递后，钙信号在数秒内达到峰值，持续数分钟，揭示免疫应答的钙依赖性。
药物筛选：通过监测药物对钙信号的影响，可快速评估免疫调节剂的活性与毒性。
4. 高通量药物筛选：加速新药发现的“钙标尺”

在药物研发中，Fluo-4 AM可自动化检测细胞内钙浓度变化，用于筛选影响钙通道或信号通路的候选药物：

技术优势：适配96孔板、384孔板等高通量平台，单次实验可检测数千个样本，显著提升筛选效率。
案例：某药企利用Fluo-4 AM筛选出一种钙通道抑制剂，后续研究证实其可降低心肌细胞钙超载，为心衰治疗提供新方向。

三、操作指南：从实验设计到数据解读

1. 实验步骤

探针加载：将Fluo-4 AM溶解于DMSO，用细胞培养液稀释至1-5 μM，加入Pluronic F-127（0.02%）促进溶解，37℃孵育细胞15-60分钟。
洗涤与平衡：用无钙培养液洗涤细胞，去除表面残留探针，37℃孵育30分钟，确保酯酶充分水解。
荧光检测：使用488 nm激光激发，516 nm发射波长检测荧光强度，通过软件量化钙浓度变化。
2. 注意事项

温度控制：低温（如4℃）可减缓酯酶活性，延长探针加载时间；
抑制剂使用：添加Probenecid（1-2.5 mM）可减少探针外排，降低背景荧光；
光稳定性：避免长时间激光照射，防止荧光淬灭。

四、未来展望：从基础研究到临床转化

随着单细胞测序、光遗传学等技术的发展，Fluo-4 AM的应用场景正不断拓展：

单细胞钙成像：结合微流控芯片，实现单个细胞钙信号的精准解析；
活体成像：开发近红外荧光探针，用于在体监测脑、心脏等器官的钙动态；
临床诊断：通过检测患者血液或组织中的钙信号异常，辅助疾病早期诊断。

订购请致电 ：400-086-2158

来源：http://www.med-life.cn/product/1289527.html