体外转录（In vitro transcription）

技术简介
通常转录发生在生物体内，如果我们将含有RNA转录酶、NTP等条件，在体外无细胞系统中，用DNA作为模板，模仿体内转录过程生成RNA，这样的技术则能够控制转录的基因、转录的过程和转录后RNA的用途，该技术被称为体外转录。
体外转录可以用于以下几方面实验：
1. 制备实时定量检测 (Real Time PCR) 的RNA 标准品或对照。
2. 制作病毒RNA模板，作为病毒检测阳性对照，或为进一步研究病毒机理或疫苗提供模板。
3. 为RNA Marker制作特定RNA分子。
4. 大量获得某一特定组织或细胞中的RNA，为芯片、Northern杂交和Southern杂交制作高标记探针。
5. 用于蛋白质合成实验中的模板，从而合成目的蛋白质，研究目的基因的表达。
6. 将含有siRNA序列的双链Oligo DNA或构建的质粒体外转录，大量合成可用于RNA干扰(RNAi)实验的siRNA。
服务内容
（1） 目的质粒的制备
可以委托我们通过人工合成基因或基因获取等方式构建质粒；
（2） RNA合成模板的制备
将质粒DN处理为双链DNA（RNasefree）作为RNA合成的末班；
（3）RNA合成
将双链DNA（RNasefree）使用RNApolymerase体外转录成RNA；
（4）RNA精制
将体外转录的RNA进行纯化处理和质检。
提供材料
（1）含有T7 promoter或SP6 promoter的质粒，浓度≥20ng/ul，总量≥5ug；
（2）以质粒的酶切产物或PCR产物为模板进行体外转录，合成的RNA为确定序列和确定长度，更接近于您的目的序列；
（3）体外转录后的RNA中会混有部分模板DNA，使用DNase I 处理后会减少模板DNA的污染。请根据您的需要选择是否进行DNase I 处理；
（4）对于客户提供的质粒样品，我们首先要进行测序验证，并收取相应的测序费用。请您提供给我们目的序列的电子版信息及测序引物。
获得结果
体外转录获得的RNA（10ug）和实验报告；
服务价格

服务价格	收费标准	实验周期
RNA合成模板的制备	视具体情况而定	视具体情况而定
RNA合成	500元/样品	3-6个工作日
RNA精制	200元/样品	1个工作日
DNase I处理	100元/样品	1个工作日

注： 1. 需要进行人工合成基因、基因获取或质粒构建等服务请参考相关部分，没有说明的请询价。 2. 以上价格是按照T7/SP6 promotor进行体外转录的报价，其它promotor体外转录，请询价。 3. 以上价格是按照最终提供10 μg RNA计算的，需要量大时，请询价。