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- 上海雅吉生物科技有限公司
- 人食欲素受体(OXR)酶联免疫分析（ELISA） 试剂盒
￥500 - 2000
yaji
上海
2021-07-05 14:40
我要认领上海雅吉生物科技有限公司
高杰
yajikit@163.com
产品属性
产品说明
人食欲素受体(OXR)酶联免疫分析（ELISA）
试剂盒使用说明书
本试剂盒仅供研究使用。使用目的：
本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中食欲素受体(OXR)的含量。实验原理
本试剂盒应用间接法测定标本中人食欲素受体(OXR)水平。用纯化的人食欲素受体
(OXR)抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入已知浓度的食欲素受体(OXR)标准品和未知浓度的食欲素受体(OXR)待检样品，温育后，加入生物素标记的抗IgG 抗体，再与链霉亲和素-HRP结合，形成免疫复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。
TMB 在HRP 酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的食欲素受体(OXR)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中人食欲素受体(OXR)浓度。试剂盒组成
| 1 | 30 倍浓缩洗涤液 | 20ml×1 瓶 |
8 | 标准品 S1（12ng/L） | 0.5ml×1 瓶 |
| 2 | 链霉亲和素-HRP | 6ml×1 瓶 | 标准品 S2（6ng/L） | 0.5ml×1 瓶 |
| 3 | 酶标包被板 | 12 孔×8 条 | 标准品 S3（3ng/L） | 0.5ml×1 瓶 |
| 4 | 生物素标记的抗-IgG 抗体 | 6ml×1 瓶 | 标准品 S4（1.5ng/L ） | 0.5ml×1 瓶 |
| 5 | 显色剂 A 液 | 6ml×1 瓶 | 标准品 S5（0.75ng/L） | 0.5ml×1 瓶 |
| 6 | 显色剂 B 液 | 6ml×1/瓶 | 9 | 说明书 | 1 份 |
| 7 | 终止液 | 6ml×1 瓶 | 10 | 封板膜 | 2 张 |
标本要求- 不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。
- 标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融
操作步骤
- 根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定，能使用复孔的尽量做复孔。
- 加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品，其余各步操作相同）、标准品孔、待测样品孔。然后在标准品孔中加入标准品50μl，在样本反应孔中加入50微升样本，盖上封板膜，轻轻振荡混匀，37℃温育 45分钟。
- 配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用
- 洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复4次，拍干。
- 加生物素标记的抗-IgG抗体：每孔加入生物素标记的抗-IgG 抗体50μl。37℃温育 30分钟
- 洗涤：操作同4。
- 加链霉亲和素-HRP：每孔加入50μl的链酶亲和素-HRP，轻轻振荡混匀，37℃温育 30
- 洗涤：操作同4。
- 显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色
15 分钟.- 终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。
- 测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。测定应在加终止液后15分钟以内进行。
计算
以标准物的浓度为横坐标，OD 值为纵坐标，在坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释倍数；或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式，将样品的OD值待入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，即为样品的实际浓度。注意事项
- 试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。
- 浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。
- 各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间最好控制在5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。
- 如标本中待测物质含量过高（样本OD值大于标准品孔第一孔的OD值），请先将样本稀释一定倍数（n倍）后再测定，计算时请最后乘以稀释倍数（×5×n）。
- 封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。
- 本试剂不同批号组分不得混用。显色剂B请避光保存。
- 严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
- 所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。线性范围：
0.3ng/L -15 ng/L规格：
96 人份/盒保存条件及有效期
- 试剂盒保存：；2-8℃。
- 有效期：6 个月
