RIPA裂解液(强)

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Seven
北京
2021-07-05 14:57

赛文创新(北京)生物科技有限公司

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赛文创新(北京)生物科技有限公司
帖先生
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sevenbio@163.com
产品属性
数量1000
英文名RIPA
CAS号SW104
保质期12个月
供应商赛文创新(北京)生物科技有限公司
保存条件4℃避光
规格30ml/100ml
产品说明
RIPA裂解液(强)
货号:SW104
规格:30ml/100ml
保存条件:4℃避光
运输条件:常温

产品简介:
RIPA裂解液(RIPA Lysis Buffer)是一种传统的细胞、组织快速裂解液。RIPA裂解液裂解后的蛋白样品可以用于常规的Western、IP等。RIPA裂解液有很多配方,按效果来分主要分为强,中,弱三种。本裂解液为RIPA强裂解液,其主要成分为50mM Tris-Hcl,150mM NaCl,1 mM EDTA-Na2, 1% Triton X-100,1% sodium deoxycholate,0.1% SDS。

组份:
产品货号产品名称规格
SW104-01/SW104-02RIPA裂解液(强)30ml/100ml

保存条件:4℃避光保存,一年有效

操作说明:
对于组织样品:
1.组织块用冷PBS洗涤,去除血污。剪成小块置于匀浆器中。
2.加入10倍组织体积本试剂(使用前数分钟内加入蛋白酶抑制剂)冰上彻底匀浆。
3.将匀浆液转移至1.5ml离心管中,振荡。冰浴30min,期间用移液器反复吹打,确保细胞完全裂解。
4.12000g离心5min,收集上清,即为总蛋白溶液。

对于培养细胞样品:
1.对于贴壁细胞:
a.用PBS冲洗细胞2-3次。最后一次彻底吸干残留液。
b.加入适当体积的细胞总蛋白提取试剂(使用前数分内加入蛋白酶抑制剂)于培养板、瓶内3-5分钟。期间反复晃动培养板、瓶,使试剂与细胞充分接触。
c.用细胞刮刀将细胞及试剂刮下,收集到1.5ml离心管中。
2.对于悬浮细胞:离心收集细胞,每6孔板细胞加约250 ul细胞总蛋白提取试剂(在使用前数分钟内加入蛋白酶抑制剂),振荡。
3.冰浴30min,期间每10分钟用200ul移液器反复吹打数次,确保细胞完全裂解。
4.12000g离心5min,收集上清,即为总蛋白。
注意事项:
对于组织样品:
每50mg组织约加入1ml的本试剂裂解。对于软骨、皮肤等组织,可适当减少试剂用量,以提高蛋白浓度。
对于培养细胞样品:
1.正常细胞密度下,每个6孔板细胞加入250ul左右裂解液。其它类推。
2.裂解时可能会出现较粘稠状。可用移液器反复吹打,直至呈 液状为止。如果一直较稠,可再加入适量裂解液。
3.此试剂对人体有害,请适当防护。