品名：PCR Mycoplasma Test Kit支原体检测试剂盒
品牌产地：德国AppliChem
产品货号: A3744
规格：20Tests
存储温度：-20°C
运输方式：干冰运输
产品特色：1. 引物源自支原体基因的保守序列
2. 即用型PCR mix使用更方便
3. 优化的反应体系，快速准确
4. 提供阳性对照
AppliChem原体检测试剂盒均根据支原体16S rRNA 保守序列设计引物，经由PCR 反应扩增其16S rRNA 片段，可用于检测绝大多数支原体，如
M. arginini, M. arthritidis, M. bovis, M. capricolum,M. fermentans, M. hominis, M. hyorhinis, M. orale, M. pneumonia, M.pulmonis, M,salivarium 等，灵敏度达100~1000CFU/ml。
产品说明书下载：http://www.applichem.com/fileadmin/produktinfo/a3744_en.pdf产品背景：支原体是一种没有细胞壁的原核生物，大多呈不规则球状或丝状。由于它的直径小，而且形状灵活，所以能逃过实验室常用的滤膜。实验室细胞培养过程中,培养细胞株的支原体感染最为常见,感染率达到10-80%,传统抗生素对支原体污染已不能奏效。在细胞研究中，细胞培养被支原体污 染已成为世界性难题，也是让每个细胞实验室工作者头疼的问题。支原体感染发生后能改变细胞的DNA,RNA及蛋白表达，又不能通过可视法对其进行检测，而 且它对细胞的生长率影响较小，很多实验人员都察觉不到支原体的污染，据统计，超过25%的细胞系中感染了支原体，细胞培养被支原体污染已成为世界性难题，也是让每个细胞实验室工作者头疼的问题。
培养物进行常规的支原体检测非常重要。尽管各个实验室的检测频率不同，从几个星期到几个月不等，不过这主要取决于你们实验室有多少人接触细胞，以及你们引进新细胞的频率。比如美国国立细胞培养中心，它经常从其他实验室获得细胞培养物，就会对每个样品进行检测，并将它们隔离，直至最后证明没有支原体污染。一般来说，每两三个月进行一次定期检测是必要的。如果有新细胞进入实验室，或准备将细胞进行液氮保存，都应该进行检测。当然，如果细胞不大对劲，应立马检测。
检测频率是一方面，选择合适的检测方法也很重要。到底是PCR、生化分析，ELISA还是免疫荧光呢？PCR应该是检测支原体的理想方法，他综合了几个优势，灵敏、特异、快速、廉价等。细胞培养上清可以直接用来检测，非常方便。Applichem公司提供的高灵敏度PCR Mycoplasma Test Kit（A3744）,该试剂盒引物源于支原体基因的保守序列，而且即用型的PCRmix使您的使用更加方便，同时更是提供了阳性对照。当然为了避免假阳性和假阴性，试验中必须设立多种对照：除了阳性对照外，还有阴性对照和内对照。
北京西美杰科技有限公司代理AppliChem试剂，向您推荐完整的细胞支原体污染解决方案，PCR Mycoplasma Test Kit能通过高度灵敏的支原体基因保守序列，提供给你即用型的PCR Mix试剂盒，能快速检测您的细胞或者样品是否被含有支原体；支原体的预防则针对细胞培养过程中各个可能支原体的污染源进行消毒的产品，如针对CO
2培养箱的喷雾消毒产品、培养箱内的水源消毒溶液以及水浴箱等设备的消毒试剂；如果您的细胞已经被支原体污染，那么我们推荐您使用Myco系列挽救您的珍贵细胞。西美杰为您提供一站式的支原体解决方案！
支原体是一种大小介于细菌和病毒之间(最小直径0.2μm)并独立生活的微生物，没有细胞壁，表面由胞质膜构成，约有1%的支原体可通过滤菌器。支原体污染细胞后，培养液可不发生混浊，多数情况下细胞病理变化轻微或不显著。细微变化也可由于传代、换液而缓解，因此易被忽视。但个别严重者，可致细胞增殖缓慢，甚至从培养器皿脱落。支原体污染细胞后会影响下游试验结果。 德国Applichem 所提供Myco 系列支原体清除产品可以直接整合到质膜上破坏支原体的完整性，从而有效地清除支原体污染，而且没有细胞毒性。另有支原体检测与预防试剂盒可以给细胞提供更多的安全保护。Myco-3（A5240）使用方法Myco-3主要成分为氟喹酮类的环丙沙星，100倍浓缩液直接加入培养基中，每2~3天换液一次，连续处理14天，可清除大多数支原体污染。用Myco-3无法清除的顽固支原体或停用后又出现支原体污染的情况建议使用Myco-1和Myco-2来处理。注：Myco-3停用2周后方可进行支原体检测。
相关产品：1. 顽固性支原体清除产品：Myco-1（A5222）与Myco-2（A5233）Myco-1 的主要成分为泰妙菌素，Myco-2 的主要成分为二甲胺四环素（四环素衍生物）。Myco-1 与Myco-2 均为100 倍浓缩液，直接加入培养基中。两者配合使用：用Myco-1 处理4 天后换Myco-2处理3 天，如此重复2~3 次即可。Myco-1 与Myco-2 不影响支原体检测，因此细胞在用这2 种抗生素处理的过程中可直接进行支原体检测。
Myco-4（A8366） NEW!
专利配方，细胞毒性极低，可彻底清除细胞（包括贴壁细胞和悬浮细胞）及病毒培养物中的支原体污染。产品由1瓶起始处理液和3 瓶维持液组成。
使用方法
1. 取4.5ml 细胞培养基（含5%FCS）加入到无菌培养瓶或培养皿中，再加入500ul Myco-4 起始处理液混匀。
2. 向培养瓶中加入5ml 待处理细胞（约104~105 单个细胞，含5% FCS） 注：需确保细胞被完全分散成单个细胞；而且加入细胞时需将滴头直接浸入5ml 混合液中，以避免支原体逸散到空气中。
3. 正常培养至80%~90%培养瓶后进行正常传代，每9.5ml 传代细胞中加入500ul 的Myco-4 维持液。
4. 2 次重复第三步，即用Myco-4 维持液连续处理3 次可完全清除全部支原体。
注意事项：
1. 一次处理细胞不要超过105 单个细胞；
2. 高浓度的FCS 中的蛋白质与脂类物质会影响Myco-4 与支原体质膜结合，因此在处理过程中要求使用5%FCS 浓度；
3. 病毒中的支原体需要与其宿主细胞一起处理；
4. Myco-4 是与支原体直接接触后发挥作用的，而不规则细胞形态和细胞团块都将影响Myco-4 与支原体的直接接触，因此在使用该产品建议用胰酶将细胞处理成表面光滑的单个细胞。
2. 支原体预防系列Incubator-Clean（A5230）——CO2 培养箱消毒剂
Incubator-Clean 的活性成分为四苯甲基化合物，用于正在进行细胞培养的CO2 培养箱的消毒，可以有效预防真菌（及芽孢）、细菌、病毒（包括HIV、HBV）等污染！另外Incubator-Clean 还可用于无菌工作台的消毒！每次实验操作前用本品对台面进行喷雾处理。
使用方法：喷头对准CO2 培养箱的内壁进行喷雾使内壁完全湿润即可，使用时无须移出正在培养的细胞。建议培养箱每2 周用Incubator-Clean 处理一次。
Incuwater-Clean（A5219）——CO2 培养箱水源消毒剂
Incuwater-Clean 是一种用于CO2 培养箱内保持空气湿度的水源消毒剂，不会对金属水盘造成腐蚀。100 倍浓缩直接加入灭菌水中，使用方便。建议培养箱中每2~4 周更换一次灭菌水，加入Incuwater-Clean。
Aquabator-Clean（A9390）——水浴锅消毒剂
Aquabator-Clean 用于预防各种水浴锅中真菌、细菌污染。使用时每升水中加入2ml Aquabator-Clean，建议每1~2 周向水浴锅中加一次该试剂，每4~6 周给水浴锅换一次水。
3. 支原体污染检测系列
AppliChem 的3 种支原体检测试剂盒均根据支原体16S rRNA 保守序列设计引物，经由PCR 反应扩增其16S rRNA 片段，可用于检测绝大多数支原体，如M. arginini, M. arthritidis, M. bovis, M. capricolum,M. fermentans, M. hominis, M. hyorhinis, M. orale, M. pneumonia, M.pulmonis, M,salivarium 等，灵敏度达100~1000CFU/ml。
PCR Mycoplasma Test Kit（A3744）
试剂盒组份
Reaction Mix
Buffer Solution
Positive Template Control
qPCR Mycoplasma Test Kit（A9019）
适用仪器：LightCycler®1.2, 1.5, 480, Rotor-GeneTM3000, 6000, ABI Prism®7000, iCycler iQ®, iQTM5, Opticon 2,Chromo 4, MX300P®, MX4000®。
试剂盒组份
Primer/Probe/Nucleotide Mix
Rehydration Buffer
Positive Control DNA
Internal Control DNA
PCR Grade Water
* Taq DNA polymerase 需要自备，建议使用SuperHot Taq DNA polymerase。
