肺炎支原体(Mycoplasma pneumonia;M.Pneumonia)是人类支原体肺
炎的病原体,主要在气管、支气管和细支管的上皮细胞内增殖,从而引起原发性
非典型肺炎(细支气管周围间质性肺炎)及全身多脏器损害。本产品是基于荧光
定量 PCR 法的肺炎支原体的快速、高效检测试剂盒。它具有下列特点:
1. 即开即用,用户只需要提供 DNA 模板。
2. 根据 P1 基因保守序列设计引物,引物经过优化,特异性高。预期的 PCR 产
物长度为 136 bp。
3. 荧光定量检测,所含 SYBR Green I 只与双链 DNA 结合,反应特异性强。
4. 本产品只适用于科研,不能用于临床诊断。
规格及成分 成分 编号 50 次包装
2×qPCR Mix 90408 1 mL
MP 专一性引物一 yw1051 200 μL
MP 专一性引物二 yw1052 200 μL
阳性对照 10511052 100 μL
超纯水 100935 1 mL
使用手册 1 份
运输及保存 低温运输,-20℃保存,保存期限一年。
自备试剂 样品等
使用方法 一、样品 DNA 的制备
用自选方法提取肺炎支原体 DNA。注意:DNA 纯化方法是决定检测灵敏度
的关键因素。如果不能很好纯化样品 DNA,后面的 PCR 再灵敏也不能提高
整体检测灵敏度。
二、PCR 检测(25 μL 体系)
1. 在 PCR 管中加入下列成分:
成分 样品 阳性对照 阴性对照
2×qPCR Mix 12.5 μL 12.5 μL 12.5 μL
MP DNA 模板 1-5 μL 无 无
阳性对照 无 2 μL 无
MP 专一性引物一(正向引物) 2 μL 1 μL 1 μL
MP 专一性引物二(反向引物) 2 μL 1 μL 1 μL
补水到 25 μL
注: 1. 为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原,本产品不提供活体病毒做阳性
对照,只提供没有传染性的、可以直接使用的 DNA 片段作为阳性对照。
2. 使用本阳性对照时,由于其浓度较高,一定要注意不要污染其他试剂和
成分。最好在专门的区域操作。
2. 建议 PCR 反应参数(具体 PCR 参数可以根据仪器不同而自行优化)
过程 温度 时间
活化 95℃ 7 min
PCR 反应
(45 个循环)
95℃ 15 s
65℃ 25 s
3. 采集
具体操作按所用仪器推荐的流程进行。本产品中所含的荧光染料在没结合
DNA 时,最大吸收光谱在 471nm,结合 DNA 时的最大吸收光谱在 500nm,
最大发射光谱在 530nm。
关联产品 肺炎链球菌荧光定量 PCR 试剂盒(CAT#:11-Sp-50)