- 960化工网
- 上海澳音生物科技有限公司
- HMSC-ad人脂肪来源干细胞/人脂肪间充质干细胞/人脂肪干细胞/流式鉴定
1500
澳音生物
中国
2021-07-05 15:47
我要认领上海澳音生物科技有限公司
吴先生
sino_aoyin@163.com
产品属性
产品说明
细胞提供完整的流式鉴定报告，以及成骨分化结果。
产品图片均为本公司出入库拍摄
培养条件：HMSC-ad人脂肪干细胞专用培养基；37℃，95%空气，5%二氧化碳
传代周期：3-5天
传代次数：8-10代
传代比例：4000-10000/平方厘米
细胞描述：正常的脂肪来源的人间充质干细胞，具备分化成脂肪、成骨和软骨的 能力。据报道，该细胞 CD29、CD44、CD73、CD90、CD105、CD166 表达阳性； CD14、CD31、CD34、CD45 表达阴性。中科院参考图片：
细胞操作详细步骤----贴壁细胞1.细胞复苏1.1准备一个T25的细胞培养瓶并做好标记，预热好的细胞完全培养基，一支15ml离心管，离心管中加入4-5ml细胞完全培养基。1.2取出细胞冻存管，在37度水浴中快速解冻，将管子擦干并消毒后迅速拿回生物安全柜。1.3将细胞悬液转移到加有培养基的离心管中，1000转离心5分钟。1.4倒掉上清，加入培养基轻轻重悬细胞亦可先将细胞团弹散后加入培养基混匀。1.5将重悬好的细胞转移到T25细胞培养瓶，补充培养基到8ml左右，十字摇晃，将细胞铺匀后放入培养箱培养。2.细胞传代2.1准备细胞完全培养基，细胞培养瓶，胰酶（0.05%Trypsin-0.11mM EDTA），DPBS。2.2弃上清，并加2-3mlDPBS轻柔冲洗培养瓶内细胞1-2次。2.3加入1ml胰酶，室温或者37度消化，直到细胞成片脱落，加入3-4ml完全培养基终止消化，如果有成团块脱落的细胞可轻轻吹打分散细胞后再终止消化。（注意：消化时间与所用胰酶效价，消化时候细胞密度以及温度等因素有关，建议第一次消化时候，多在显微镜下观察，以找到最佳消化时间）2.4收集细胞悬液，1000转离心5分钟，弃上清，加入培养基轻轻重悬细胞亦可先将细胞团弹散后加入培养基混匀。2.5将重悬好的细胞按比例分装至T25细胞培养瓶，补充培养基到8ml左右，十字摇晃，将细胞铺匀后放入培养箱培养。3.细胞冻存3.1准备细胞冻存液，细胞冻存管，胰酶（0.05%Trypsin-0.11mM EDTA），DPBS。3.2弃上清，并加2-3mlDPBS轻柔冲洗培养瓶内细胞1-2次。3.3加入1ml胰酶，室温或者37度消化，直到细胞成片脱落，加入完全培养基终止消化，如果有成团块脱落的细胞可轻轻吹打分散细胞后再终止消化。3.4收集细胞悬液，1000转离心5分钟，弃上清。3.5加入冻存液，重悬细胞，并分装到冻存管，冻存密度0.5-1×106细胞/ml。3.6将冻存管放入程序降温盒，并放到-80℃冰箱，过夜后将冻存管转移到液氮保存。仅供研究之用
联系我们：
