TUNEL原位凋亡检测

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2021-07-06 10:15

南京博恩生物技术有限公司

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刘经理
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产品属性
提供商南京博恩生物技术有限公司
服务名称TUNEL原位凋亡检测(TUNEL试剂盒免费)
规格
产品说明



基因组DNA断裂时,暴露的3’-OH可以在末端脱氧核苷酸转移酶(Terminal Deoxynucleotidyl Transferase, TdT) 的催化下加上荧光素 (FITC) 标记的dUTP (fluorescein-dUTP) ,从而可以通过荧光显微镜或流式细胞仪进行检测,这就是TUNEL (TdT-mediated dUTP Nick-End Labeling) 法检测细胞凋亡的原理。此外,也可以通过DAB染色的方式来进行普通显微镜的拍照。


试验方法:
对于贴壁细胞或细胞涂片
a. PBS或HBSS洗涤一次。
b. 如果细胞贴得不牢,可以干燥样品使细胞贴得更牢。
c. 用固定液(P0098)固定细胞30-60分钟。
d. 用PBS或HBSS洗涤一次。
e. 加入含0.1% Triton X-100的PBS,冰浴孵育2分钟。
f. 转步骤5。
对于悬浮细胞或细胞悬液
a. 收集细胞(不超过200万细胞),PBS或HBSS洗涤一次。
b. 固定细胞30-60分钟。为防止细胞聚集成团,宜在侧摆摇床或水
平摇床上缓慢摇动的同时进行固定。
c. 用PBS或HBSS洗涤一次。
d. 用含0.1% Triton X-100的PBS重悬细胞,冰浴孵育2分钟。
e. 转步骤5。
对于石蜡切片
a. 二甲苯中脱蜡5-10分钟。换用新鲜的二甲苯,再脱蜡5-10分钟。无水乙醇5分钟。90%乙醇2分钟。70%乙醇2分钟,蒸馏水2分钟。
b.滴加20μg/ml不含DNase的蛋白酶K,20-37℃作用15-30分钟(不同组织的最佳作用温度和时间需自行摸索)。
c. PBS或HBSS洗涤3次。注意:这一步必须把蛋白酶K洗涤干净,否则会严重干扰后续的标记反应。
d. 转步骤5。
对于冷冻切片
a. 固定细胞30-60分钟。
b. PBS或HBSS洗涤2次,每次10分钟。
c. 加入含0.1% Triton X-100的PBS,冰浴孵育2分钟。
d. 转步骤5。


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1、动物疾病模型制备:http://www.biornscience.com/News_read_id_128.shtml

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3、动物行为学实验:http://www.biornscience.com/News_read_id_149.shtml

4、western blot实验(全长marker整膜抗体孵育):http://www.biornscience.com/News_read_id_129.shtml

5、ceRNA网络/lncRNA/circRNA/miRNA相关研究:http://www.biornscience.com/News_read_id_138.shtml

6、腺病毒、慢病毒、腺相关病毒转染:http://www.biornscience.com/News_read_id_137.shtml

7、荧光素酶报告基因实验:http://www.biornscience.com/News_read_id_189.shtml

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9、裸小鼠移植瘤、普通小鼠荷瘤、癌转移动物模型:http://www.biornscience.com/News_read_id_203.shtml

10、原代细胞提取、培养基相关实验:http://www.biornscience.com/News_read_id_151.shtml

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15、细胞铁死亡相关研究实验:http://www.biornscience.com/News_read_id_204.shtml

16、各类细胞实验:http://www.biornscience.com/News_read_id_193.shtml

17、原位杂交(FISH):http://www.biornscience.com/News_read_id_192.shtml

18、免疫组化实验:http://www.biornscience.com/News_read_id_190.shtml

19、流式细胞术检测细胞亚型:http://www.biornscience.com/News_read_id_184.shtml

20、流式细胞术检测巨噬细胞极化:http://www.biornscience.com/News_read_id_183.shtml

21、活性氧ROS检测:http://www.biornscience.com/News_read_id_182.shtml

22、自噬相关实验及自噬流检测:http://www.biornscience.com/News_read_id_179.shtml

23、小管形成实验:http://www.biornscience.com/News_read_id_178.shtml

24、EdU细胞增殖实验:http://www.biornscience.com/News_read_id_177.shtml

25、TUNEL凋亡染色:http://www.biornscience.com/News_read_id_175.shtml

26、免疫共沉淀实验(coip):http://www.biornscience.com/News_read_id_154.shtml

27、流式细胞术检测细胞周期:http://www.biornscience.com/News_read_id_146.shtml

28、流式细胞术检测细胞凋亡:http://www.biornscience.com/News_read_id_145.shtml

29、各类病理切片染色:http://www.biornscience.com/News_read_id_143.shtml

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33、流式细胞术检测小胶质细胞极化:http://www.biornscience.com/News_read_id_148.shtml

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