Blood (Serum/Plasma)Total RNA Extraction Kit血液(血清/血浆)总RNA抽提试剂盒 【
产品简介】
本试剂盒采用独特的配方和添加剂,能高效的分离血清、血浆及其它无细胞体液等样品中分离出游离的RNA,另外本试剂还可以有效地抑制各种外源性和内源性的RNA酶,同时结合特制的纯化柱,能最大限度的保持RNA的完整性、高得率以及纯度,并能保留小RNA,为需要进行小RNA研究,如MicroRNA的用户提供了强有力的工具。
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试剂盒组成】
| 试剂盒组成 | 50次 | 100次 |
| 裂解液LZ | 60ml | 120ml |
| 漂洗液WB | 12ml | 24ml |
| 洗脱液EB | 2×2ml | 4×2ml |
| 离心纯化柱 | 50个 | 100个 |
| 说明书 | 1份 | 1份 |
注意:使用前请在漂洗液WB加入48ml无水乙醇,若低温情况下,裂解液LZ有析出情况,请将其室温放置,待其完全溶解后使用。【试剂运输及储存条件】试剂运输可在
2-8℃环境下进行。储存时,裂解液LZ须置4℃保存,其余组分可保存在室温。
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自备实验器材】
试剂类:无水乙醇、DEPC水。
耗材类:经DEPC水处理并高压灭菌(121℃,30分钟)的2ml和1.5 ml离心管及10ml、200ml、1000ml吸嘴、一次性手套及口罩。
设备类:各种规格的移液器、低温和常温台式离心机、震荡仪。
【操作步骤】- 取100-200ml的血液(血清)样品,加入1ml裂解液LZ,用移液器吹打数次混匀。
- 将裂解物转移至另一新的无RNA酶离心管中,并加入1.5倍体积的无水乙醇,用移液器吹打数次混匀。
注意:由于实验室常用1.5ml离心管,建议裂解物可分成两管,然后分别向其内加入1.5倍无水乙醇。- 立即吸取700μl样品以及有可能形成的沉淀,加入带有2ml收集管的离心纯化柱,轻盖盖子,室温静置2min。10,000 x g,室温离心15s,弃尽废液。
- 将剩余的样品转移至离心柱,重复第3步。
- 往离心柱中加入500μl漂洗液WB,轻盖盖子,10,000 x g,室温离心15s,弃尽废液。
注意:第一次使用前请确认是否已经往WB中加入48ml无水乙醇。- 重复第5步,往离心柱中加入500μl漂洗液WB,轻盖盖子,10,000 x g,室温离心15s,弃尽废液。洗涤后10,000 x g离心空柱2min干燥硅胶膜。
注意:完全去除洗液对最后溶解是非常重要的,洗液的残留会影响最终的洗脱。- 将离心柱转移至一新的无RNA酶的1.5ml离心管中,往硅胶膜中央滴加洗脱液EB,轻盖管盖,室温静置5min,11,000 x g 离心1min洗脱RNA。
注意:洗脱体积不宜小于30μl,否则会影响洗脱效果。- 把洗脱液滴加回硅胶膜重复第7步洗脱。
如需后续操作,请始终将溶解的RNA至于冰上,保存请置于-80℃。