SDS-PAGE蛋白电泳套装
| 名称 | 规格 | 保存条件 |
| 5×蛋白上样缓冲液(含DTT) | 1ml | -20度 |
| Tris-甘氨酸蛋白电泳缓冲液 | 一包(10L) | RT |
| 30%丙烯酰胺(29:1) | 100mlX2 | 2-8度 |
| 1.5mol/LTris(pH8.8) | 100mlX2 | RT |
| 1.0mol/LTris(pH6.8) | 60ml | RT |
| 过硫酸铵干粉 | 2g | RT |
| 10%SDS | 10ml | RT |
| TEMED | 1.5ml | RT |
| 说明书 | 一份 | 一份 |
产品简介本公司提供的蛋白电泳套装包含凝胶制备,蛋白上样缓冲液及蛋白电泳上样缓冲液。
本公司生产的SDS-PAGE蛋白电泳套装是按照经典方法配制而成。本套装根据电泳体系的大小,可进行约50次左右。
使用说明:一,前期工作:蛋白提取及定量。
二,蛋白上样液的制备:蛋白上样缓冲液解冻,轻轻混匀,按4体积蛋白样品加入一体积的5×蛋白上样缓冲液,混匀,沸水中水浴5分钟。
三,电泳液的配制:将一包电泳液干粉全部倒入1L-2L的烧柄中,加一定量的水溶解成2L配成5×Tris-甘氨酸蛋白电泳缓冲液,用前再稀释5倍或者先配成1L成为10×Tris-甘氨酸蛋白电泳缓冲液,用前再稀释10倍。
四,取10-15支1.5ml离心管,将过硫酸铵干粉分装成100mg/支,标记好备用。
五,凝胶制备:
1, 取一支称好的100mg过硫酸铵干粉,加入1ml蒸馏水,混匀,此配好的10%过硫酸铵溶液2-8度可保存一周,一周后请用新的。洗干净电泳玻璃板,夹好。
2, 根据目标蛋白分子量大小,选取凝胶浓度,按下表配制。先配分离胶,再配浓缩胶。
| 分离胶15% | 分离胶12% | 分离胶10% | 分离胶8% | 浓缩胶(5%) |
| 总体积 | 10ml | 10ml | 10ml | 10ml | 5ml |
| 30%丙烯酰胺(29:1) | 5ml | 4ml | 3.3ml | 2.7ml | 0.83ml |
| 1M Tris-HCL (PH6.8) | 0 | 0 | 0 | 0 | 0.625ml |
| 1.5M Tris-HCL(PH8.8) | 2.5ml | 2.5ml | 2.5ml | 2.5ml | 0 |
| 10%SDS | 100ul | 100ul | 100ul | 100ul | 50ul |
| ddH2O | 2.3ml | 3.3ml | 4.0ml | 4.6ml | 3.42ml |
| 10%过硫酸铵 | 100ul | 100ul | 100ul | 100ul | 75ul |
| TEMED | 10ul | 10ul | 10ul | 10ul | 7.5ul |