- 960化工网
- 麒盟（上海）生物医学有限公司
- 细胞生长曲线、细胞活性
¥1 - 1000
2021-07-06 13:39
我要认领麒盟（上海）生物医学有限公司
房忠锋
fangzf63@163.com
产品属性
产品说明
1.
技术原理细胞生长曲线是测定细胞绝对生长数的常用方法，也是判定细胞活力的重要指标，是培养细胞生物学特性的基本参数之一。一般细胞传代之后，经过短暂的悬浮然后贴壁，随后度过长短不同的潜伏期，即进入大量分裂的指数生长期。在细胞达到饱和密度后，停止生长，进入平顶期，然后退化衰亡。为了准确描述整个过程中细胞数目的动态变化，典型的生长曲线可分为生长缓慢的潜伏期，斜率较大的指数生长期，呈平台状的平顶期及退化衰亡4个部分。以存活细胞数(万/mL)对培养时间(h或d)作图，即得生长曲线。根据其检测的原理，可以分为三种检测方法：1) MTT或者CCK-8法。原理是正常细胞代谢旺盛，粒体内的琥珀酸脱氢酶，可将四唑盐类物质（如 MTT、XTT、WST-1等）还原为紫色的结晶状的物质或者高度水溶性的黄色甲臜产物（CCK-8法），沉积在细胞周围，然后通过酶标仪读取OD值，从而检测到细胞增值状态。
2）LDH法：通过检测细胞培养上清中LDH的酶活性，来检测细胞增殖状态。
3）荧光法：基于蓝色、非荧光性染料刃天青，接受了来自活细胞线粒体呼吸链中释放的电子时，被还原成粉红色荧光染料（试卤灵）；通过对其颜色、荧光的变化的观察来实现检测。产物试卤灵的总量与活细胞数量成直接比例关系。荧光法比用其他检测法（例如，MTT）具有更高的灵敏度，非常适合于低细胞毒性分析，并且能进行长时间保温（例如24~48小时）。它适合于增殖型和非增殖型细胞，也可用于悬浮和贴壁细胞。2. 实验步骤取生长状况良好的细胞，常规消化制成单细胞悬液，计数，调整细胞成六个浓度梯度，依次为：5×103，1×104，2×104，3×104，4×104，5×104/ml，均匀接种细胞于96孔细胞培养板，每孔加细胞悬液200 μl，每个浓度组设六个复孔，共接种七块培养板， 37℃，5% CO2浓度，饱和湿度培养箱中连续孵育24/48/72/96/120/148/172小时后，进行检测。以培养时间为横轴，吸光值为纵轴，绘制生长曲线。3. 服务流程1）客户与麒盟生物沟通确定所需要进行实验的细胞类型。
2）麒盟生物根据客户需求选择检测方法，并进行细胞增殖实验。
3）麒盟生物提供实验结果和报告，包括数据分析及绘制生长曲线。
