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北京百奥莱博主要从事生物试剂的生产和销*(代"售"),产品线涵盖细菌蛋白提取试剂盒批发在内的分子生物学试剂产品,还包括PCR及荧光定量PCR、核酸提取试剂盒类、样本核酸保护试剂、核酸提取、克隆与转化、蛋白纯化、蛋白检测、免疫组化、细胞凋亡与抗体等。
名称:细菌蛋白提取试剂盒批发
编号:RFT159
规格:100次
英文名:Bacterial protein extraction kit
品牌:百奥莱博
产地:北京
细菌蛋白提取试剂盒使用温和的非离子型去污剂,适用于大肠杆菌表达的重组蛋白提取。提取过程中不需进行超声破碎等复杂的操作步骤,有效避免了外源蛋白的污染。该试剂盒在抽提试剂的基础上添加了溶菌酶、DNaseⅠ和蛋白酶抑制剂混合物,可提高蛋白提取效率并减轻因DNA引起的粘稠现象,有效避免蛋白降解。所提取的蛋白保持了生物学活性,可进行IP、Western blot实验,也可直接通过Ni-NTA 等纯化填料进行蛋白纯化。该试剂盒既可适用于小量蛋白表达检测,也适用于大量蛋白的表达纯化试验;既适用于纯化可溶型蛋白,也适用于纯化包涵体蛋白。每次提取使用1ml 缓冲液计算,该试剂盒可以使用100次。
试剂盒组成:
| 组份 | 规格 | 贮存 |
| 细菌蛋白提取缓冲液 | 100 ml | 常温 |
| 蛋白酶抑制剂(100×) | 1 ml | -20℃ |
| 溶菌酶 50mg/ml | 1 ml | -20℃ |
| DNase I | 1000 U | -20℃ |
使用方法:一、可溶型蛋白操作方法(1 ml菌液为例)
1、8000rpm常温离心 3min 后,弃上层培养基,留取管底部菌体(尽量弃除掉培养基) 。
2、加入 200μl细菌蛋白提取液,2μl DNase I和4μl 溶菌酶重悬菌体,用吸头吹打至无可见细胞团块。
3、置于常温孵育 10-15min,期间轻弹离心管数次以加速裂解。
4、裂解完成后 13,000rpm 于4℃离心5 min,将上清转移至新的容器中,溶液可直接进行下一步纯化或检测试验。
二、包涵体蛋白操作方法(1 ml菌液为例)
1、上述步骤4 中,弃上清,保留沉淀组分,用200μl 的细菌蛋白提取液重悬沉淀。
2、加入4μl溶菌酶,混合均匀,常温孵育 10-15 min。
3、加入 800μl 的灭菌水混合均匀。
4、13,000 rpm常温离心5min,弃上清后用 900μl 灭菌水重悬沉淀,然后加入 200μl 细菌蛋白提取液,混合均匀。
5、13,000rpm 室温离心5 min,重复步骤4 三至五次。
6、将沉淀溶解于变性溶液中,进行下一步纯化或复性试验。
细菌蛋白提取试剂盒批发极具性价比,此外,我公司正火爆促销以下产品:
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·5×双色蛋白上样缓冲液(还原)
编号:RFT070
英文名称:5×DualColor Protein loading buffer (reducing)
规格:5×1ml
5×DualColor蛋白上样缓冲液(双染料)是5倍浓缩的SDS-PAGE凝胶电泳上样缓冲液,应用于还原型SDS-PAGE的蛋白样品制备和上样。该缓冲液中含有两种示踪染料:*酚蓝和吡啰红Y,可以指示SDS-PAGE电泳过程以及Weastern blot的转膜效率。该缓冲液已经加入DTT,可使蛋白质分子的链内二硫键和链间二硫键断裂,经考马斯亮蓝染色以后在电泳凝胶上显现清晰蛋白条带。
操作步骤
融化-混合-变性-上样
1、将5×双色蛋白上样缓冲液37℃数分钟解冻后轻轻摇匀,以确保溶液混合均匀。
2、将缓冲液与蛋白样品按照1:4的比例混匀。
3、将蛋白样品置于95℃中加热5分钟。
4、待蛋白样品充分变性后冷却至室温,快甩离心收集到管底,直接加入SDS-PAGE凝胶加样孔内电泳。
注意事项:1.由于含有DTT,该缓冲液不适合于Native SDS-PAGE电泳。
2. 一般说来,电泳中吡啰红Y泳动速度快于*酚蓝,但在高浓度SDS-PAGE胶中(高于15%分离胶),吡啰红Y泳动速度慢于*酚蓝。
储存条件:-20℃。
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