Trizol/总RNA提取试剂
1. 推荐操作步骤 :
1) 取50-100mg组织加入lml总RNA提取试剂匀浆,冰浴5min。如果从细胞中提取,直接在5×106 或1×107 的细胞中加入lml总RNA提取试剂充分混匀使细胞裂解,冰浴5min;
2) 将样品转移到1.5ml离心管中(所用物品均应无RNAse酶),每毫升RNA提取液加入0.4ml氯仿,充分混匀,冰浴放置5min;
3)18000 g 4℃离心, 15min;
4) 将上层水相转移到另一干净l.5ml离心管中,加等体积异丙醇,混匀置于零下20℃冰箱培养10min;
5)18000 g 4℃离心, 15min;
6) 弃上清,加入l.5ml 70%冷乙醇洗涤冰浴5min(所用物品及试剂均应无RNAse酶污染),12000 g 4℃ 离心5min;
7) 弃上清,干燥RNA,加适量无RNase水(1mM EDTA 溶于0,1%DEPC水)溶解RNA。(切记RNA不能完全干燥,否则不易溶解)。
2.包装:100ml/500ml
3.保存条件:-70℃
4.有效期: 一年