植物可溶性酸性转化酶ELISA检测试剂盒使用说明书

仅供体外研究使用，不用于临床诊断!
细胞外基质磷酸糖蛋白(MEPE)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Matrix Extracellular Phosphoglycoprotein (MEPE) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
淋巴细胞功能关联抗原1α(LFA1α)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Lymphocyte Function Associated Antigen 1 Alpha (LFA1a) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
含缬酪肽蛋白(VCP)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Valosin Containing Protein (VCP) 48T/96T Homo sapiens (Human)
神经介素U(NMU)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Neuromedin U (NMU) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
信号传导转录激活因子6(STAT6)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Signal Transducer And Activator Of Transcription 6 (STAT6) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
阿黑皮素原(POMC)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Proopiomelanocortin (POMC) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
脑啡肽酶(NEP)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Neprilysin (NEP) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
利钠肽受体1(NPR1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Natriuretic Peptide Receptor 1 (NPR1) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
利钠肽受体2(NPR2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Natriuretic Peptide Receptor 2 (NPR2) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
利钠肽受体3(NPR3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Natriuretic Peptide Receptor 3 (NPR3) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
叶酸受体1(FOLR1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Folate Receptor 1, Adult (FOLR1) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
跨膜丝氨酸蛋白酶6(TMPRSS6)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Transmembrane Protease, Serine 6 (TMPRSS6) 48T/96T Homo sapiens (Human)
神经肽Y受体Y5(NPY5R)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Neuropeptide Y Receptor Y5 (NPY5R) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
活化T-细胞核因子2(NFATC2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Nuclear Factor Of Activated T-Cells, Cytoplasmic 2 (NFATC2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
TERF1相互作用核因子2(TINF2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for TERF1 Interacting Nuclear Factor 2 (TINF2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
溶质载体家族30成员10(SLC30A10)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Solute Carrier Family 30, Member 10 (SLC30A10) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
内β-N-乙酰基氨基葡萄糖苷酶(ENGASE)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Endo Beta-N-Acetylglucosaminidase (ENGASE) 48T/96T Homo sapiens (Human)
孕酮免疫调节结合因子1(PIBF1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Progesterone Immunomodulatory Binding Factor 1 (PIBF1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
乙醛氧化酶1(AOX1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Aldehyde Oxidase 1 (AOX1) 48T/96T Bos taurus; Bovine (Cattle)
血管紧张素1-7(Ang1-7)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Angiotensin 1-7 (Ang1-7) 48T/96T Canis familiaris; Canine (Dog)
11-β-羟基类固醇脱氢酶3(HSD11β3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for 11-Beta-Hydroxysteroid Dehydrogenase Type 3 (HSD11b3) 48T/96T Homo sapiens (Human)
肾肿瘤抗原(RAGE)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Renal Tumor Antigen (RAGE) 48T/96T Homo sapiens (Human)
趋化因子C-C-基元配体1(CCL1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Chemokine C-C-Motif Ligand 1 (CCL1) 48T/96T Ho样本处理及要求:
1. 血清：将收集于血清分离管的全血标本在室温放置2小时或4℃过夜，然后1000×g离心20 分钟，取上清即可，或将上清置于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。
2. 血浆：用EDTA或肝素作为抗凝剂采集标本，并将标本在采集后的30分钟内于2-8℃ 1000×g离心15分钟，取上清即可检测，或将上清置于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。
3. 组织匀浆：用预冷的PBS (0.01M, pH=7.4)冲洗组织，去除残留血液（匀浆中裂解的红细胞会影响测量结果），称重后将组织剪碎。将剪碎的组织与对应体积的PBS（一般按1:9的重量体积比，比如1g的组织样品对应9mL的PBS，具体体积可根据实验需要适当调整，并做好记录。推荐在PBS中加入蛋白酶抑制剂）加入玻璃匀浆器中，于冰上充分研磨。为了进一步裂解组织细胞，可以对匀浆液进行超声破碎，或反复冻融。最后将匀浆液于5000×g离心5~10分钟，取上清检测。
4. 细胞培养物上清或其它生物标本：请1000×g离心20分钟，取上清即可检测，或将上清置于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。
注：标本溶血会影响最后检测结果，因此溶血标本不宜进行此项检测。

需要而未提供的试剂和器材:
1.酶标仪（450nm）
2.高精度加样器及枪头：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL
3.37℃恒温箱
4.蒸馏水或去离子水
植物可溶性酸性转化酶ELISA检测试剂盒注意事项:
1.严格按照规定的时间和温度进行温育以保证准确结果。所有试剂都必须在使用前达到室温20-25℃。使用后立即冷藏保存试剂。
2.洗板不正确可以导致不准确的结果。在加入底物前确保尽量吸干孔内液体。温育过程中不要让微孔干燥掉。
3.消除板底残留的液体和手指印，否则影响OD值。
4.底物显色液应呈无色或很浅的颜色，已经变蓝的底物液不能使用。
5.避免试剂和标本的交叉污染以免造成错误结果。
6.在储存和温育时避免强光直接照射。
7.平衡至室温后再打开密封袋以防水滴凝聚在冷板条上。
8.任何反应试剂不能接触漂白溶剂或漂白溶剂所散发的强烈气体。任何漂白成分都会破坏试剂盒中反应试剂的生物活性。
9.不能使用过期产品。
10.如果可能传播疾病，所有的样品都应管理好，按照规定的程序处理样品和检测装置。
试剂准备:
试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡后方可使用。 20×洗涤缓冲液的稀释：蒸馏水按1：20稀释，即1份20×洗涤缓冲液加19份蒸馏水。
操作步骤:
1. 从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条，剩余板条用自封袋密封放回4℃。
2. 设置标准品孔和样本孔，标准品孔各加不同浓度的标准品50μL；
3. 样本孔中加入待测样本50μL；空白孔不加。
4. 除空白孔外，标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的检测抗体100μL，用封板膜封住反应孔，37℃水浴锅或恒温箱温育60min。
5. 弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液（350μL），静置1min，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复洗板5次（也可用洗板机洗板）。
6. 每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。
7. 每孔加入终止液50μL，15min内，在450nm波长处测定各孔的OD值。
实验结果计算:
以所测标准品的OD值为横坐标，标准品的浓度值为纵坐标，在坐标纸上或用相关软件绘制标准曲线，并得到直线回归方程，将样品的OD值代入方程，计算出样品的浓度。