本产品可检测pg级别抗原，具有更好的信噪比和更持久的信号，适于检测地丰度蛋白。
产品简介：本产品是免疫印迹实验中辣根过氧化物酶（HRP）的高灵敏增强型底物试剂盒。基于新一代增强型化学发光底物研制而成，在HRP的催化下发生化学反应而发光。用于检测固定在膜上的蛋白质等生物大分子，其高灵敏度能够检测pg级别的抗原。发光信号强烈持久，可以使用照相技术（X-光胶片曝光）或者其他成像方法检测。
产品特点：· 灵敏度高
· 更好的信噪比
· 更持久的信号
保存条件： 室温避光保存
操作步骤：1.二抗孵育完毕后，将印迹膜充分洗涤；
2.根据需要量，将试剂A和试剂B按照1：1的比例等体积混合，即为化学发光检测底物工作液；
3.弃去洗涤缓冲液，将发光底物工作液滴加在印迹膜上，确保工作液覆盖整张膜，室温孵育5分钟； 4.去掉多余发光底物工作液，将印迹膜轻柔的置于两层干净的塑料薄膜之间；
5.暗室内X-光胶片曝光。
注意：1.为获得最佳实验结果，请务必优化实验条件，包括检测样品的用量、一抗、二抗稀释度以及杂交膜及封闭试剂的选择；
2.由于牛奶中含有内源性生物素，在使用亲和素/生物素系统时，封闭液中请避免使用牛奶；
3.在封闭缓冲液及所有抗体稀释液中加入高质量的吐温-20 （终浓度为0.05 ％ ），以减少非特异性结合；
4.由于叠氮钠是HRP抑制剂，在缓冲液中避免使用叠氮钠作为防腐剂；
5.整个免疫印迹实验过程请确保印迹膜始终处于湿润状态，避免干燥；
6.为获得最佳实验效果，在抗体孵育及洗膜过程中请使用摇床；
7.在膜操作过程中请带手套操作或者使用干净的镊子，避免蛋白污染；
8.避光条件下，配制好的化学发光检测底物工作液可在室温下稳定8小时。如暴露于阳光或其他强光下，工作液会受影响。为获得最佳效果，可于棕色瓶中配制工作液，避免强光长时间的照射。正常实验室灯光短时间照射不影响工作液的使用；
9.实验过程中，请使用干净的器材。保证非金属设备没有明显划痕，金属设备表面无锈。锈可能导致膜上带有污点或者高背景。
可能出现的问题及解决方法：| 问题 | 可能原因 | 解决方法 |
| 胶片反相（白色条带，黑色背景） |
系统中HRP过量 |
稀释HRP标记物至少10倍以上 |
| 膜上出现棕色或黄色条带 |
| 暗室中看到强烈发光 |
| 发光信号持续时间过短 |
信号较弱或者无信号 | 发光反应系统中HRP过多，消耗底物过快，引起信号迅速降低 | 稀释HRP标记物至少10倍以上 |
| 抗原/抗体量不够 | 增加抗原/抗体使用量 |
| 蛋白转移率低 | 优化转移系统 |
高背景 | 系统中HRP过量 | 稀释HRP标记物至少10倍以上 |
| 封闭不足 | 优化封闭程序 |
| 封闭试剂选择不当 | 选择另一种封闭试剂 |
| 冲洗不充分 | 增加冲洗时间，次数 |
| 曝光过度 | 减少曝光时间 |
| 抗原/抗体浓度过高 | 降低抗原/抗体使用浓度 |
蛋白条带为点状 | 蛋白转移失败 | 优化转移过程 |
| 膜未平衡 | 按照说明书处理膜 |
| X-光胶片与膜之间有气泡 | 曝光前去除所有气泡 |
| 出现非特异条带（信号维持时间较短，高背景） | 系统中HRP过多 | 稀释HRP标记物 |
| 出现非特异条带（信号维持时间正常，背景干净） | 一抗用量过多 | 进一步稀释一抗 |
| SDS导致非特异结合 | 在实验过程中避免使用SDS |
