消毒产品消毒效果检验技术规范

中国科学院广州化学研究所分析测试中心
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消毒产品消毒效果检验技术规范
2.1.1消毒剂杀微生物试验
2.1.1.1 适用范围
主要适用于消毒剂鉴定和日常监测，用来评价各种用途的消毒剂对微生物的杀灭效果。按此方法进行的试验，只是对消毒剂的杀菌能力的重要方面进行验证，侧重反映消毒剂的实用剂量与杀菌能力。不能反映消毒剂的全面特性。
2.1.1.2 菌悬液与菌片的制备
2.1.1.2.1 适用范围
制备消毒剂杀菌试验用细菌悬液与菌片，以供消毒剂杀菌试验时使用。
2.1.1.2.2 试验器材
（1）菌种:金黄色葡萄球菌ATCC 6538、铜绿假单胞菌ATCC 15442、大肠杆菌8099、枯草杆菌黑色变种ATCC9372、龟分枝杆菌脓肿亚种ATCC 93326、白色葡萄球菌8032、白色念珠菌ATCC10231、黑曲霉菌ATCC16404。在上述规定的菌株基础上，根据消毒剂特定用途或试验特殊需要，还可增选其他菌株。
（2）有机干扰物：见附录A。
（3）磷酸盐缓冲液：见附录A。
（4）无菌蒸馏水。
（5）稀释液：见附录A。
（6）细菌培养基：胰蛋白胨大豆琼脂培养基（TSA），胰蛋白胨大豆肉汤培养基（TSB）等，见附录A。
（7）革兰染色液：见附录A。
（8）芽孢染色液：见附录A。
（9）恒温水浴箱。
（10）玻璃漏斗。
（11）刻度吸管（1.0ml、5.0ml、10.0ml），毛细吸管。
（12）数字可调移液器（10μl， 20μl， 100μl，200μl，1000μl）及配套用一次性塑料吸头。
（13）离心机。
（14）电动混合器
（15）浊度计。
2.1.1.2.3 细菌悬液制备程序
（1）细菌繁殖体悬液的制备
1）取冻干菌种管，在无菌操作下打开，以毛细吸管加入适量营养肉汤，轻柔吹吸数次，使菌种融化分散。取含 5.0 ml～10.0ml 营养肉汤培养基试管，滴入少许菌种悬液，置37℃培养18h～24h。用接种环取第1代培养的菌悬液，划线接种于营养琼脂培养基平板上，于37℃培养 18h～24h。挑取上述第2 代培养物中典型菌落，接种于营养琼脂斜面，于37℃培养18h～24h，即为第3代培养物。

2）取菌种第3代～14代的营养琼脂培养基斜面新鲜培养物（18h～24h），用5.0ml吸管吸取3.0 ml～5.0ml稀释液加入斜面试管内，反复吹吸，洗下菌苔。随后，用5.0ml吸管将洗液移至另一无菌试管中，用电动混合器混合（振荡）20s，或在手掌上振敲80次，以使细菌悬浮均匀。
3）初步制成的菌悬液，先用细菌浓度比浊测定法粗测其含菌浓度，然后以稀释液稀释至所需使用的浓度。
4）细菌繁殖体悬液应保存在4℃冰箱内备用。应当天使用不得过夜。
5）怀疑有污染时，应以菌落形态、革兰染色与生化试验等法进行鉴定。
（2）细菌芽孢悬液的制备
1）取冻干菌种管，在无菌操作下打开，以毛细吸管吸加适量营养肉汤培养基，轻柔吹吸数次，使菌
2.1.2 消毒剂模拟现场和现场消毒鉴定试验
2.1.2.1 消毒剂对食(饮)具消毒效果的模拟现场鉴定试验
2.1.2.1.1 目的
鉴定消毒剂对食(饮)具上细菌的杀灭作用，以验证该消毒剂对食(饮)具消毒的实用剂量。
2.1.2.1.2 试验器材
(1)大肠杆菌(8099)。对尚需用于杀灭其他特定细菌者，可增用该特定细菌进行试验。菌悬液制备按2.1.1.2规定的方法和要求进行。
(2))磷酸盐缓冲液(PBS，0.03mol/L，pH7.2)
(3)稀释液：见附录A。
(4)中和剂(按2.1.1.5方法鉴定合格者)
(5)胰蛋白胨大豆琼脂培养基
(6)无菌棉拭
(7)规格板(用可略弯曲的软性材料制备，中央留一大小为5.0cm×5.0cm空格作为采样部位)。
(8)试验用食(饮)具样本 瓷碗（盘）或竹（木）筷前端（周长2.0cm， 长度为12.5cm。
2.1.3 空气消毒效果鉴定试验
2.1.3.1 目的
检测消毒器械或消毒剂对空气中细菌的杀灭和(或)清除作用，以验证其对空气的消毒效果。其他方法对空气的消毒效果，亦可参照本试验的有关原则进行。
结果计算 杀灭率 杀灭率 消亡率
涉及地区：广东省消毒产品消毒效果检验技术规范、浙江省消毒产品消毒效果检验技术规范、福建省消毒产品消毒效果检验技术规范、海南省消毒产品消毒效果检验技术规范、云南省消毒产品消毒效果检验技术规范、广西省消毒产品消毒效果检验技术规范、贵州省消毒产品消毒效果检验技术规范、新疆省消毒产品消毒效果检验技术规范、四川省消毒产品消毒效果检验技术规范、重庆市、西藏省消毒产品消毒效果检验技术规范、湖南省消毒产品消毒效果检验技术规范、江西省消毒产品消毒效果检验技术规范、湖北省消毒产品消毒效果检验技术规范、上海市消毒产品消毒效果检验技术规范、北京市消毒产品消毒效果检验技术规范、天津市消毒产品消毒效果检验技术规范、安徽省消毒产品消毒效果检验技术规范、江苏省消毒产品消毒效果检验技术规范、甘肃省消毒产品消毒效果检验技术规范、宁夏省消毒产品消毒效果检验技术规范、内蒙古省消毒产品消毒效果检验技术规范、黑龙江省消毒产品消毒效果检验技术规范、吉林省消毒产品消毒效果检验技术规范、辽宁省消毒产品消毒效果检验技术规范、山东省消毒产品消毒效果检验技术规范、陕西省消毒产品消毒效果检验技术规范、山西省消毒产品消毒效果检验技术规范、河南省消毒产品消毒效果检验技术规范、河北省消毒产品消毒效果检验技术规范