IVM未成熟卵培养液,IVM培养液
IVM未成熟卵培养液
IVM未成熟卵培养液可用于在10-24小时内将未成熟卵(GV或MI)培养至MII。其中添加了EGF、重组FSH可有效提高成熟率及受精率。
IVM未成熟卵培养液可用于在10-24小时内将未成熟卵(GV或MI)培养至MII。其中添加了EGF、重组FSH可有效提高成熟率及受精率。
产品成分
| 成分 | 含量 |
|---|
| 胎牛血清(FBS) | 5% |
| EGF | 3ng/ml |
| rhFSH | 50mIU/ml |
| bingtong酸钠 | 0.25mmol/L |
| 青霉素 | 0.5% |
| 链霉素 | 0.5% |
| α-MEM培养液 | 基础培养液 |
产品特点
即用型培养液。以α-MEM为基础培养液添加了EGF和重组FSH,小鼠GV卵20小时成熟率可达80%,成熟卵IVF后受精率60-70%。
产品用途
适用于未成熟卵培养
使用方法
1. 本产品请置于-20℃长期保存。可分装保存,请勿反复冻融。
2. 使用前室温解冻,解冻过程中反复摇匀。由于碳酸氢钠可能会沉淀析出,呈絮状结晶,请用力摇匀或37℃水浴中加热10分钟左右,大多数情况下絮状物可消失,如果仍然存在微量沉淀,不必过滤,可直接使用。
3.本产品4℃可保存2个月。
4. 需在37℃、5%的二氧化碳培养箱内进行过夜预平衡或提前平衡4小时。
小鼠IVM实验简要步骤
1.小鼠促排卵及取卵
(1)雌性小鼠注射5IU的PMSG。
(2)48h后杀鼠取双侧卵巢置于M2培养液中(提前覆油预热10-15分钟),剥去卵巢胞膜,细针戳碎卵巢至破棉絮状,以释放卵丘卵母细胞复合体(COCs)。卵丘细胞紧密包裹在卵子周围。
2. 制备IVM培养皿,小皿中制IVM培养滴(30ul/滴)数个,上盖2ml矿物油防蒸发。37℃,5%CO2培养箱中过夜平衡。
3.镜下口吸管吸取GV期COCs,置于其中1-2个IVM培养滴中反复吹打,直至M2培养液完全去除,移到同皿新滴中37℃,5%CO2培养箱中培养16~18小时。
4.培养后机械性剥除卵丘细胞(CCs)即可见成熟的MII期卵母细胞(排出完整第一极体)。