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最新更新日期：2021-07-12 15:16

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细胞水平的研究，比基因和蛋白水平的研究往往更进一步。体外细胞培养可以获得大量的细胞和其代谢产物，通过对细胞的增殖能力，周期变化，凋亡程度，侵袭、迁移能力等指标进行检测后，可进一步研究信号通路相关基因的表达及功能变化。细胞培养技术是生物技术中最核心的技术，是研究基因、蛋白功能的必经之路。

1，流式上机检测细胞周期所需要的细胞量大概是多少?

答：周期检测一般采用6孔板进行实验，每孔细胞量在10的6次方左右。如果进行周期预实验，则检测所需要的时间点较多，一般每隔12小时，需要取6个时间点，每个时间点都需要留细胞样待测。需要的细胞量较大，务必通过细胞扩增得到所需实验的细胞量。
2，流式上机检测细胞凋亡每次所需要的细胞量大概是多少?

答：靶细胞接种到6孔板中进行前期药物处理/转染/感染后备用。对于个体比较大的细胞，依据实际细胞密度，使用6cm培养皿培养细胞，最终进行检测需要105-106个细胞。
3，用Transwell小室进行不同实验所需的孔径有何要求？

答：不同的Transwell实验要求需要选择合适的孔径,共培养要求上室细胞不能穿过聚碳酸酯膜进入下室,一般采用0.4μm共培养；进行迁移以及趋化性实验（上室细胞可穿过聚碳酸酯膜进入下室），我们建议采用的是8μm或12μm 孔径。
4，CCK-8试剂盒检测细胞增殖和毒性的优点有哪些？

答：CCK-8较传统的MTT法优点在于1）MTT被线粒答：体内的一些脱氢还原酶还原成的formazan不是水溶性的，需要有特定的溶解液来溶解，而CCK-8产生的formazan都是水溶性的，可以省去后续的溶解步骤；2）CCK-8检测灵敏度更高，更加稳定；3）酚红和血清对其测定无明显影响；4）不必去上清，不必洗涤细胞，更加简便；5）对细胞无明显毒性，加入显色后，可以在不同时间反复用酶标仪读板，使检测时间更加灵活，而且不影响细胞进行后续实验。
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