药物结构确认
中国科学院广州化学研究所分析测试中心
卿工---189--3394-6343

• 元素分析

仪器：元素分析仪，型号：vario EL cube，品牌：德国元素
测试条件：燃烧管1150℃，还原管850℃
检测结果：

测试项目	检测方法	单位	检测结果	理论值（分子式为C9H18N2O3Ptl3H20）	测定值与理论值最大偏差（%）
C	JY/T 017-1996	%	24.17	23.95	0.22
H	JY/T 017-1996	%	4.95	5.32	0.37
N	JY/T 017-1996	%	6.22	6.21	0.01

由上表可见，样品（批号为：B20151001）的碳、氢、氮含量的实测值与含3个结晶水的（药品结构分析）（分子式为C₉H₁₈N₂O₃Ptl3H₂0）的碳、氢、氮含量的理论值非常接近。

二、IR（红外）测试
仪器：北京瑞丽光谱仪器公司 WQF-520A傅里叶变换红外光谱仪
测试条件：KBr压片法
测试结果：各个样品的吸收峰等列表如下：

吸收峰cm-1	基团	强度
（药品结构分析）样品 批号：B20151001
3444	-OH	S
3218、3149	N-H	M
2971、2939	C-H	M
1450、1371	CH3、CH2	M
1621	CH3CH2OCOO-	S

解析：1、3444cm^-1，为结晶水-OH伸缩振动吸收峰，属强吸收峰
2、3218、3149cm^-1，为伯胺N-H伸缩振动吸收峰，属中等强度吸收峰；
3、2971、2939 cm^-1，为甲基、亚甲基C-H伸缩振动吸收峰，属中等强度吸收峰；
4、1450 、1371cm^-1，为甲基、环烷烃CH2变形振动吸收峰，属中等强度吸收峰；
5、1621 cm^-1，为乳酸络合成盐振动吸收峰，属强吸收峰；
可见，样品（批号为：B20151001）的红外光谱图的特征吸收峰符合（药品结构分析）的特征官能团的吸收峰。

三、NMR（核磁共振）测试
仪器：德国 Bruker DRX- 400 ，400MHz超导脉冲傅里叶变换核磁共振谱仪；
测试条件：溶剂： DMSO-d₆
参考物： TMS
温度： 20ºC
频率：¹H谱：400.130MHz；¹³C谱：100.613MHz
测试结果：样品（批号为：B20151001）经核磁共振氢（¹H）谱、碳（¹³C）谱、DEPT（DEPT135和DEPT90）谱、¹H-¹H COSY谱、¹³C-¹H COSY谱、HMBC谱分析，确证该样品的化学结构与1,2-二氨甲基-环丁烷-乳酸合铂的化学结构（见结构图）相符。


核磁共振谱解析如下：
1、氢（¹H）谱
扫描谱宽：6009.615Hz (15.0ppm)，打印谱宽5208.333Hz (13ppm)。
谱中的δ 1.05 (3H, d, 6.8)为乳酸的1＇位甲基峰, δ 3.79（1H, m, 6.8）为其2＇位次甲基峰；δ 1.61（2H, m）为环丁烷3位CH₂其中的1个质子峰和4位CH₂其中的1个质子峰；δ 1.88(2H, m)为环丁烷3位CH₂的另一个质子峰和4位CH₂的另一个质子峰；δ 2.32(2H, m)为5位CH₂其中的1个质子峰和7位CH₂其中的1个质子峰； δ 2.71(4H, m)为5位CH₂的另一个质子峰和7位CH₂的另一个质子峰以及1、2位的CH质子峰；δ 4.62(1H, s) 、δ 4.93(1H, s)和δ 4.86(1H, d, 29.6)、δ 5.09(1H, d, 29.6)为6位、8位氨基四个质子峰，结晶水的质子峰与氘代DMSO的水峰合在一起（δ 3.38）。数据见附表1。

2、碳（¹³C）谱、DEPT谱
扫描谱宽249.0716Hz (250 ppm)，打印谱宽20551.725Hz (215ppm)。
DEPT谱辅助碳谱解析如下：δ 22.20为3位、4位的CH₂ 碳峰，δ 50.28为5位（或7位）的CH₂ 碳峰，δ 50.51为7位（或5位）的CH₂ 碳峰，δ 23.57为1＇位的CH₃碳峰, 1位和2位的CH碳峰（δ 39.63）藏在DMSO溶剂峰中，δ74.13为2＇位的CH碳峰，δ 192.27为3＇位的羰碳峰。数据见附表2。

3、¹H -¹H COSY谱
谱宽3787.879×3787.879Hz，采样点2048×256，FT1024×512。
谱中的δ 1.05与δ 3.79相关，是乳酸1′位甲基质子与2＇位次甲基质子的偶合，δ 1.61与δ 1.88相关，是3位（4位）CH₂两个质子之间的偶合。δ 1.61（δ 1.88）与δ 2.71相关，是3位（4位）CH₂质子与2位（1位）CH质子的偶合。δ 2.32 与δ 2.71是5位（7位）CH₂两个质子之间的偶合。δ 4.62与δ 4.93是6位NH₂ 两个质子之间的偶合, δ 4.82与δ 5.13、δ 4.93与δ 5.06是8位NH₂ 两个质子之间的偶合。数据见附表3。

4、 ¹³C -¹H COSY谱
谱宽22123.895×6009.615Hz，采样点2048×256，FT1024×512。
¹³C -¹H COSY谱给出与质子直接相连的碳-氢相关信息，有助于指定碳谱、氢谱峰的归属。谱中环烷部份1位(2位) 、3位(4位), 5位、7位碳氢的关系以及乳酸部份1＇位、2＇位碳氢的相关关系如下：1位(2位) δ_C 39.63 与δ_H 2.71相关 ；3位(4位)δ_C 22.20与δ_H 1.61、δ_H 1.88相关；5位（或7位）δ_C 50.28与δ_H 2.32、δ_H 2.71相关；7位（或5位）δ_C 50.51与δ_H 2.32、δ_H 2.71相关；1＇位δ_C 23.57与δ_H 1.05相关； 2＇位δ_C 74.13与δ_H 3.79相关。数据见附表3。

5、 HMBC谱
谱宽6775.068×22123.895Hz，采样点4096×256，FT2048×512。
HMBC谱给出与质子2~3键相关的碳峰信息，有助于把化合物的骨架连接起来。谱中显示：δ 192.27 (C3＇)羰碳与δ 1.05(H1＇)、δ 3.79 (H2＇)相关，δ 74.13(C2 ＇) 与δ 1.05(H1′)相关，表明乳酸的存在。δ 22.20(C3、C4)与δ 1.61 (H4、H3)相关，δ 39.63 (C1、C2)与δ 2.32、δ 2.71 (H5、H7)相关，表明环丁烷及氨甲基支链基的存在。

6、 综上所述，确证该样品的化学结构与1,2-二氨甲基-环丁烷-乳酸合铂的化学结构相符。

四、MS（质谱）测试
仪 器：三重四级杆液相色谱-质谱联用仪（TSQ Quantum Ultra）
测试条件：喷雾电压：±3.0kV；喷雾温度：200℃；毛细管温度：300℃；鞘气流速：30arb；
辅助气流速：5arb
测试结果：谱图结果显示样品（批号为：B20151001）的分子量与（药品结构分析）的分子量基本一致。MS谱图的解析如下：
M/Z 398为（M+H）⁺
M/Z 439为（M+Na+H₂O+H）⁺
M/Z 795为（2M+H）⁺
M/Z 1192为（3M+H）⁺
注：结晶水的峰可能与甲醇溶剂中的水峰合在一起（M/Z 439）

五、DSC分析
仪 器：美国 TA-Q200差示扫描量热仪
测试条件：扫描温度范围：40摄氏度～280摄氏度，扫描速率：10摄氏度／min.氮气氛围
测试结果：从DSC图可见，127.01℃的峰是分子结晶水的脱附吸热峰；215.57℃的峰是样品的分解放热峰。

六、TGA分析
仪 器：德国耐驰TG209F3热重分析仪
测试条件：升温速率：10°/min，温度范围：40~800℃ ，气氛：氮气
测试结果：
从TGA图可见：40.0℃~131.0℃，质量损失11.51%；
131.0℃~202.0℃，质量损失0.29%；
202.0℃~262.0℃，质量损失34.03%；
262.0℃~798.9℃，质量损失9.38%
. 并且，样品（批号为：B20151001）在49.0～131.0℃的温度范围出现明显的质量损失，因此样品中应含有结晶水。

七、X-射线粉末衍射测试
仪 器：日本理学公司D/max-1200 X-射线衍射仪
测试条件：Target： Cu；工作电压：40kV；工作电流：30mA
测试结果：
样品（批号为：B20151001）的X-衍射数据列表

2θ	d-value	I/IO
15.280	5.7938	100
21.180	4.1913	72
12.520	7.0642	70
12.360	7.1553	54

解析：该样品的X-射线衍射谱给出了角度、晶面间距和相对强度的数据，相态为结晶型。

八、粒度测试
仪 器：日立电子S-4800场发射扫描电镜
测试条件：工作电压：2kV；最大放大倍数：100000倍
测试结果：
经扫描电镜观察，样品（批号为：B20151001）多呈规整球状粒子，粒径范围如下：
45nm~70nm，约10%；
70nm~120nm，约46%；
120nm~160nm，约32%；
160nm~200nm，约12%。

九、UV（紫外）测试
仪 器：日本岛津 UV-2550紫外分光光度计
测试条件：溶 液：甲醇；
浓 度：样品（批号为：B20151001）：99mg/L
测试结果：从紫外谱图可知，样品（批号为：B20151001）无紫外吸收。

十、ICP分析
仪 器：电感耦合等离子体质谱，型号：安捷伦7900X
测试条件：温度：常温，王水浸泡-消解-定容-上机
测试结果：

分析项目	检测方法	单位	检测结果
Pt	ICP-MS	g/kg	12.6
Au	ICP-MS	mg/kg	0.57

由上表可见，样品（批号为：B20151001）含有Pt。
十一、综合解析
1、元素分析：样品（批号为：B20151001）的碳、氢、氮含量的实测值与含3个结晶水的（药品结构分析）（分子式为C₉H₁₈N₂O₃Ptl3H₂0）的碳、氢、氮含量的理论值非常接近；
2、红外：样品（批号为：B20151001）的红外光谱图的特征吸收峰符合（药品结构分析）的特征官能团的吸收峰；
3、核磁：确证样品（批号为：B20151001）的化学结构与1,2-二氨甲基-环丁烷-乳酸合铂的化学结构相符；
4、质谱：谱图结果显示样品（批号为：B20151001）的分子量与（药品结构分析）的分子量基本一致；
5、 DSC： 样品（批号为：B20151001）有分子结晶水的脱附吸热峰（127.01℃的峰）和分解放热峰（215.57℃的峰）； 
6、TGA：样品（批号为：B20151001）在几个温度范围内均有质量损失且确认含有结晶水；
7、X-射线粉末衍射：样品（批号为：B20151001）的相态为结晶型；
8、粒度测试：样品（批号为：B20151001）多呈规整球状粒子；
9、紫外：样品（批号为：B20151001）无紫外吸收；
10、ICP：确认样品（批号为：B20151001）含有Pt；
11、结论：综上所述，确证样品（批号为：B20151001）的结构式如下：


备注：1、检测方法：元素分析、红外、核磁、质谱、差热、热重、粉末X-射线衍射（晶型）、粒度、紫外和ICP；
2、各检测项目的谱图见附图说明。

******** 报告结束 ********


附表1
¹H核磁共振谱数据及解析

仪器名称及型号：超导脉冲傅里叶变换核磁共振谱仪
德国 Bruker DRX-400
溶剂: DMSO-d₆

质子序号	化学位移d(ppm)	多重性	质子数	偶合常数J(Hz)	备注
a	1.05	d	3	6.8	1′位之CH3
b	1.61	m	2		3位、4位之CH2之一
c	1.88	m	2		4位、3位之CH2 之一
d	2.32	m	2		5位、7位之CH2之一
e	2.71	m	4		5位7位之CH2 之一以及1位、2位CH
f	3.79	m	1	6.8	2′位之CH
g	4.62	s br	1		6位NH2之一
h	4.86	d br	1	29.6	8位NH2之一
i	4.93	s br	1		6 位NH2之一
j	5.09	d br	1	29.6	8 位NH2之一
k	3.38	s br			结晶水的质子峰与氘代DMSO的水峰

附表2
¹³C核磁共振谱数据及解析

仪器名称及型号：超导脉冲傅里叶变换核磁共振谱仪
德国 Bruker DRX-400
溶剂: DMSO-d₆

序号	化学位移d(ppm)	碳原子数	备注
A	22.20	2	3位, 4位CH2
B	23.57	1	1＇位CH3
C	39.63	2	1, 2位CH
D	50.28	1	5/7位CH2
E	50.51	1	7/5位C H2
F	74. 13	1	2＇位CH
G	192.27	1	3＇位C=O

附表3
核磁共振谱数据及解析

仪器名称及型号：超导脉冲傅里叶变换核磁共振波谱仪
德国 Bruker DRX-40
溶剂: DMSO-d₆

序号	C	碳原子数	DEPT碳型	H	COSY 相关峰	HMBC相关峰 碳与氢
1	39.63	1	CH	2.71(1H, m)	H4	H4, H5
2	39.63	1	CH	2.71(1H, m)	H3	H7, H3
3	22.20	1	CH2	1.61(1H, m) 1.88(1H, m)	H4,H2	H4
4	22.20	1	CH2	1.61(1H, m) 1.88(1H, m)	H 3,H1	H3
5/7	50.28	1	CH2	2.32(1H, m ) 2.71(1H, m)	H7
’6/8			NH2	4.62(1H, s) 4.93(1H, s)	H（δ4.93） H（δ4.62）
7/5	50.51	1	CH2	2.32(1H, m) 3.71(1H, m)	H5
8/6			NH2	4.86(1H, d, 29.6) 5.09(1H, d, 29.6)	H（δ4.82）-H（δ5.13） H（δ4.93）-H（δ5.06）
1’	23.57	1	CH3	1.05(3H, d, 6.8)	H2’	H2’
2’	74.13	1	CH	3.79(1H, m, 6.8)	H1’	H1’
3’	192.27	1	C=O			H1’,H2’

涉及地区：广东省药物结构确认及杂质分析、浙江省药物结构确认及杂质分析、福建省药物结构确认及杂质分析、海南省药物结构确认及杂质分析、云南省药物结构确认及杂质分析、广西省药物结构确认及杂质分析、贵州省药物结构确认及杂质分析、新疆省药物结构确认及杂质分析、四川省药物结构确认及杂质分析、重庆市、西藏省药物结构确认及杂质分析、湖南省药物结构确认及杂质分析、江西省药物结构确认及杂质分析、湖北省药物结构确认及杂质分析、上海市、北京市、天津市、安徽省药物结构确认及杂质分析、江苏省药物结构确认及杂质分析、甘肃省药物结构确认及杂质分析、宁夏省药物结构确认及杂质分析、内蒙古省药物结构确认及杂质分析、黑龙江省药物结构确认及杂质分析、吉林省药物结构确认及杂质分析、辽宁省药物结构确认及杂质分析、山东省药物结构确认及杂质分析、陕西省药物结构确认及杂质分析、山西省药物结构确认及杂质分析、河南省药物结构确认及杂质分析、河北省药物结构确认及杂质分析