| 数量 | 大量 |
| 保质期 | 12个月 |
| 保存条件 | 4°C |
| 规格 | 50ml,100ml |
| 植物蛋白提取试剂Plant protein extraction kit，P1258 | ||||||||
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| 价格说明：市场价的9折，量大有优惠，欢迎洽谈！ 描述：植物蛋白提取试剂适用于多种植物根，茎，叶及果实等的新鲜或冻存组织。植物组织成分复杂，含有较多酚类物质、多糖、色素、次生代谢物质等，致使植物蛋白质的分离提取变得困难和复杂。本试剂采用优化的试剂和程序，快速有效提取多种植物中的可溶性和疏水性蛋白成分，有效去除植物组织所含的多酚、多糖、醌、色素、脂质、次生代谢物质等干扰蛋白质研究的成分，使提取的蛋白质处于最佳的活性状态和检测状态，适应于酶学活性测定，单向及双向蛋白电泳，Western Blot和免疫共沉淀分析等蛋白质研究实验。 组成和贮存： 无色透明的提取试剂50 ml可进行100次提取；或100 ml进行200次提取。4°C密封避光1年。 用途： 提取多种植物组织和细胞的可溶性和疏水性蛋白。如苹果、花生、土豆、烟叶、菠菜、梅花等。 操作步骤： 1. 组织匀浆，必须充分匀浆，此步骤非常关键： (1) 冻存组织匀浆：预先将研钵置于－20°C ~－70°C冰箱内冷冻。取液氮冻存的植物组织，放入冰冻的研钵内研磨至粉末状，注意使组织一直处于冰冻状态，如组织颜色加深或变黑通常表明组织已融化。将研磨好的组织转移到EP 管中，按每200 mg植物组织加500 µl的比例加提取试剂，混匀后冰上放置20分钟，其间可数次颠倒混匀，以便蛋白溶解。 (2) 新鲜组织匀浆：取新鲜组织放入研钵中，按每200 mg植物组织加500 µl的比例加提取试剂，充分研磨使匀浆液中看不到大的块状或片状组织，保证组织研磨破碎。转移至离心管内，冰上放置20分钟。 2. 离心：12000 g离心15分钟，弃去沉淀。蛋白在上清中。取上清转移至新管。 3. 如果进行酶学测定，直接使用。如进行SDS-PAGE和Western Blot，将上清直接与2 x SDS sample/loading buffer (#B1007)混合后上样。或－70°C冻存。蛋白定量建议用BCA方法进蛋白定量（普利莱公司的BCA蛋白定量试剂盒#P1511）。通常上清内植物色素已基本去除，如有少量残留亦不影响蛋白定量及电泳实验。 如进行双向电泳或欲彻底清除色素等杂质可进行以下内骤: 1. 取上清液加入5倍体积的甲醇(或者丙酮)混匀，－20°C至少1小时沉淀蛋白质。 2. 12000 g离心15分钟沉淀蛋白。 3. 弃去上清。自然干燥蛋白沉淀，依据试验将沉淀溶于相应的缓冲液。如进行Western Blot 亦可用提取试剂溶解。 常见问题及解决方法： 1. 提取的蛋白量少：1) 组织蛋白含量较少，如水果等，可增加组织量；2) 组织匀浆不充分，如纤维较多的组织，破碎较困难，应适当延长匀浆时间；3) 组织过老或水分丢失致使其干燥，故尽量选用新鲜较嫩的组织；4) 甲醇或丙酮沉淀后蛋白溶解不充分，应延长溶解时间或使用较强的蛋白溶解剂。 2. 蛋白质量不佳：1)提取的蛋白有多酚或色素等杂质残留，可重复用丙酮或甲醇沉淀；2) 蛋白质降解，操作各步骤均应在冰上进行；加入蛋白酶抑制剂。 部分发表论文： Wang Fu-Xin, Ma Yin-Ping, Yang Chun-Lin, Zhao Pi-Ming, Yao Yuan, Jian Gui-Liang, Luo Yuan-Ming, Xia Gui-Xian, 2011. Proteomic analysis of the sea-island cotton roots infected by wilt pathogen Verticillium dahliae. Proteomics, 11(22): 4296-4309. IF: 4.815 Yu Xiudao, Jones Huw D., Ma Youzhi, Wang Genping, Xu Zhaoshi, Zhang Baoming, Zhang Yongjun, Ren Guangwei, Pickett John A., Xia Lanqin, 2012. (E)-β-Farnesene synthase genes affect aphid (Myzus persicae) infestation in tobacco (Nicotiana tabacum). Functional & Integrative Genomics, DOI: 10.1007/s10142-011-0244-1. IF: 3.397 Gao Shang, Yu Bo, Yuan Li, Zhai Hong, He Shao-zhen, Liu Qing-chang, 2011. Production of transgenic sweetpotato plants resistant to stem nematodes using oryzacystatin-I gene. Scientia Horticulturae, 128(4): 408-414. IF: 1.044 Shi Jiang Tao, Li Jian, 2011. A method suitable for total protein extraction from wood forming tissue of Pinus Koraiensis. Advanced Materials Research, 179-180, 1199-1202. EI收录 |
