免疫荧光染色实验服务

¥35 - 80
2021-07-12 15:56

上海研谨生物科技有限公司

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上海研谨生物科技有限公司
杨芳萍
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yanjinbio@163.com
847724139
产品属性
提供商上海研谨生物
服务名称免疫荧光染色外包服务
产品说明

服务名称:免疫荧光染色实验服务
规格:切片
价格:80
收费标准/服务周期/提供结果:
欢迎咨询详谈,我们会根据您的方案及需求制定详细的服务协议。
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免疫荧光染色实验服务


制片
选无自发性荧光的石英玻片或普通优质玻片,洗净后浸泡于无水乙醇和乙氧基乙烷等量混合液中。用时取出用绸布擦净。将待检样品如组织块剪成适当大小印压于玻片上。也可采用冰冻切片或石蜡切片样品。

二、固定
除研究细胞表面抗原或不稳定抗原可不固定外,--般均应固定。
固定的作用有三:
1.防止标本从玻片上脱落。
2.除去防碍抗原抗体结合的类脂,使抗原抗体结合物易于获得良好的染色结果。
3.固定的标本易于保存,如组织切片固定后在-20%C下可保存一年而不改变其染色特性。
标本的固定原则是:
1.不能损伤细胞内的抗原。
2.不能凝集蛋白质。
3.不能损伤细胞形态。
4.固定后应保持细胞膜的通透性,以允许抗体进入与抗原结合。

三、水洗
固定后以冷的0.01 Mol/L pH7 4PBS液浸泡冲洗,最后以蒸馏水冲洗,防止自发性荧光。

四、染色
染色分直接染色法与间接染色法。
1.材料与试剂
(1)荧光抗体,稀释至应用浓度。
(2) 0.01 Mol/L pH7 .4PBS
(3) 9份优质甘油加1pH7 .4PBS液即为甘油缓冲液。甘油有减少非特异性荧光的作用。
(4)带盖方盘
2. 直接染色法
(1)将固定好的玻片置于湿盘中,滴加荧光抗体染色液,以覆盖为度,加盖,37°C感做30min~45min.
(2) PBS冲洗3次,每次冲洗3 min,3x3冲洗。
(3)蒸馏水冲洗。
(4)滴甘油缓冲液一滴,封片,荧光显微镜检查。

3.间接染色法
(1) 检查抗原:
①取固定标本,加已知的免疫血清,37°C孵育30 min
②以PBS3x3冲洗。
③再加荧光标记的抗抗体,37°C孵育30 min
PBS 3x3冲洗。
H2O冲洗,凉干。
⑥加甘油缓冲液,封片、镜检。
(2)检查抗体:
①兔疫后动物的淋巴组织涂片,自然干燥,甲醇固定。
②滴加相应抗原液(1: 100~1: 500稀释)37°C孵育30 min.
PBS3x3冲洗。
④加荧光抗体,37°C孵育30 min.
PBS3x3冲洗。
⑥水洗,干。
⑦加甘油缓冲液,封片、镜检。

[项目开展范围]慢病毒,腺病毒,RNAI类, 分子生物实验,病理实验,免疫学实验,细胞实验,动物实验,蛋白组学实验,芯片类实验,并为广大客户朋友们提供课题设计指导、基金申请指导、SCI. 核心期刊等服务。


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