¥35 - 80
2021-07-12 15:56
我要认领上海研谨生物科技有限公司
杨芳萍
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产品属性
产品说明
服务名称:免疫荧光染色实验服务规格:切片价格:80收费标准/服务周期/提供结果:欢迎咨询详谈,我们会根据您的方案及需求制定详细的服务协议。更多实验技术服务请浏览网站其他内容,或来电详询!免疫荧光染色实验服务一、制片选无自发性荧光的石英玻片或普通优质玻片,洗净后浸泡于无水乙醇和乙氧基乙烷等量混合液中。用时取出用绸布擦净。将待检样品如组织块剪成适当大小印压于玻片上。也可采用冰冻切片或石蜡切片样品。二、固定除研究细胞表面抗原或不稳定抗原可不固定外,--般均应固定。固定的作用有三: 1.防止标本从玻片上脱落。2.除去防碍抗原抗体结合的类脂,使抗原抗体结合物易于获得良好的染色结果。3.固定的标本易于保存,如组织切片固定后在-20%C下可保存一年而不改变其染色特性。标本的固定原则是:1.不能损伤细胞内的抗原。2.不能凝集蛋白质。3.不能损伤细胞形态。4.固定后应保持细胞膜的通透性,以允许抗体进入与抗原结合。三、水洗固定后以冷的0.01 Mol/L pH7 4PBS液浸泡冲洗,最后以蒸馏水冲洗,防止自发性荧光。四、染色染色分直接染色法与间接染色法。1.材料与试剂(1)荧光抗体,稀释至应用浓度。(2) 0.01 Mol/L pH7 .4PBS液(3) 9份优质甘油加1份pH7 .4PBS液即为甘油缓冲液。甘油有减少非特异性荧光的作用。(4)带盖方盘。2. 直接染色法(1)将固定好的玻片置于湿盘中,滴加荧光抗体染色液,以覆盖为度,加盖,37°C感做30min~45min.(2) PBS冲洗3次,每次冲洗3 min,即3x3冲洗。(3)蒸馏水冲洗。(4)滴甘油缓冲液一滴,封片,荧光显微镜检查。3.间接染色法(1) 检查抗原:①取固定标本,加已知的免疫血清,37°C孵育30 min。②以PBS液3x3冲洗。③再加荧光标记的抗抗体,37°C孵育30 min。④PBS 3x3冲洗。⑤H2O冲洗,凉干。⑥加甘油缓冲液,封片、镜检。(2)检查抗体:①兔疫后动物的淋巴组织涂片,自然干燥,甲醇固定。②滴加相应抗原液(按1: 100~1: 500稀释), 37°C孵育30 min.③PBS液3x3冲洗。④加荧光抗体,37°C孵育30 min.⑤PBS液3x3冲洗。⑥水洗,干。⑦加甘油缓冲液,封片、镜检。[项目开展范围]慢病毒,腺病毒,RNAI类, 分子生物实验,病理实验,免疫学实验,细胞实验,动物实验,蛋白组学实验,芯片类实验,并为广大客户朋友们提供课题设计指导、基金申请指导、SCI. 核心期刊等服务。扫描电镜服务实时荧光定量PCR(RealTime PCR)技术服务实验代做服务: