猴免疫缺陷病毒RT-PCR试剂盒

¥2490
康朗生物
中国/上海
2021-07-12 19:52

上海康朗生物科技有限公司

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上海康朗生物科技有限公司
蔡盼
18217752821 021-61998208
shklbio@163.com
产品属性
数量大量
英文名Simian Immunodeficiency Virus(SIV)
保质期一年
供应商上海康朗生物科技有限公司
保存条件负20度
规格50次
产品说明

猴免疫缺陷病毒RT-PCR试剂盒

Simian Immunodeficiency Virus(SIV)

产品及特点

猴免疫缺陷病毒(Simian Immunodeficiency Virus,SIV)是一种 RNA 病毒,SIV 对其天然宿主的感染在很多情况下不具有致病性。对白顶白眉猴的广 泛研究已经证实,即使 SIVsmm 病毒感染了这种动物且循环病毒量很高,也不 会使它们染上任何疾病。然而,如果该病毒感染了亚洲或印度普通猕猴,则将会 在感染后期发展成猴艾滋病(SAIDS)。因此猴免疫缺陷病毒的快速准确鉴定对 该病的预防和检疫有着重要作用本产品是根据 PCR原理开发的猴免疫缺陷病毒检 测的试剂盒。它具有下列特点:



1. 一站式,用于不需要单独准备每种成分,包括引物和对照。

2. 根据猴免疫缺陷病毒的保守基因序列设计的引物,具有良好的特异性。

3. 灵敏度可以达到 1000 拷贝/反应。

4. 使用一管式 RT-PCR 技术,RT 和 PCR 两步在一个试管内完成,不需要中间 转移样品,降低了操作误差和可能的污染。

5. 本产品足够 50 次 20μL 体系的 RT-PCR。

6. 本产品只能用于科研,不能用于临床。

猴免疫缺陷病毒RT-PCR试剂盒规格及成分

编号

成 份

规格

试剂一

5×双酶一管式 RT-PCR Buffer

200 μL(橘黄盖)

试剂二

MMLV-Taq Mix

75 μL(红盖)

试剂三

超纯水

1 mL(亮黄盖)

试剂四

猴免疫缺陷病毒RT-PCR 引物 混合液

100 μL(白盖)

试剂五

猴免疫缺陷病毒RT-PCR 阳性 对照(1×10E8 拷贝/μL)

50 μL(黄盖)

试剂六天净沙核酸释放剂(试用装)20 次(1mL,绿盖)
试剂七

使用手册

1 份)

运输及保存 低温运输,-20℃保存,保存期限为 12 个月。收到货后阳性对照需要跟其他成分 分开放置,因为其容易污染其他成分,造成假阳性。

自备试剂 样品 RNA


使用方法 一、样品 RNA 的制备

1. 如果有 N 个样品,必须设置 N+2 个提取,多出的一个是 PC(样品制备阳性 对照),一个是 NC(样品制备阴性对照)。可以用 10μL 流行性出血热病毒 PCR 阳性对照的 100 倍稀释作为制备的阳性对照;用水作为制备的阴性对照。 制备所得成为样品 RNA。

2. 用自选方法纯化 N+2 个样品的 RNA,本试剂盒跟市场上大多数病毒 RNA 提 取试剂盒兼容。

二、设置 RT-PCR 反应(20μL 体系)

3. 如果有 N+2 个样品,则标记 N+4 个 PCR 管(额外增加的两个管一个是 RT-PCR 阳性对照,另一个是 RT-PCR 阴性对照)并按照下表在 PCR 管中 加入下列成分:

成分

样品

阳性对照

阴性对照

5×双酶一管式 RT-PCR Buffer

各 4 μL

4 μL

4 μL

猴免疫缺陷病毒RT-PCR 引物混合液

各2μL

2μL

2μL

N+2 个制备的 RNA 样品

各12.5 μL

超纯水

12.5 μL

猴免疫缺陷病毒RT-PCR 阳性对照 的 100 倍稀释液

L

12.5 μL

MMLV-Taq Mix1.5 μL1.5 μL1.5 μL

4. 上机进行 RT-PCR,RT-PCR 反应参数为:

过程

温度

时间

逆转录

42℃

30 sec

预变性

95℃

5 min

PCR 反应 (35 个循环)

95℃

30 sec

58℃30 sec

72℃

30 sec

延伸72℃7 min

5. 琼脂糖电泳检测扩增效果。如果阴性对照有扩增产物或阳性对照无扩增产物, 则说明实验失败,需要分析实验失败的原因。只有在阴性对照没有扩增产物、 阳性对照有 122bp 预期的扩增产物的情况下,才有必要分析样品的实验结果, 如果有扩增产物则为阳性,如果无则为阴性。

本试剂盒适用于各种 RNA制品的反转录反应以及随后的PCR扩增。它采用AMV进行反转录反应,能够获得更长的反转录产物。同时,在20ul反转录体系和50ul PCR反应体系中,还可以一次性得到足够量的PCR产物用于后续的克隆实验。本试剂盒中配置的酶均为进口的酶。RT酶采用进口的AMV,所以cDNA更长,基因的信息保留得更完整!反转录过程中特异的RNase抑制剂可有效降低由于外源RNase污染而导致实验失败的风险。本试剂盒使用方便、快捷,可广泛用于cDNA克隆及目的基因检测等分子生物学实验。
注意:
1. 本产品仅供科研使用。请勿用于医药、临床诊断或治疗,食品及化妆品等用途。请勿存放于普通住宅区。
2. 为了您的安全和健康,请穿好实验服并佩戴一次性手套和口罩操作。

特别提示:本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!