乳酸脱氢酶细胞毒性检测试剂盒

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2021-07-12 21:13

上海三抒生物科技有限公司

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上海三抒生物科技有限公司
吴先生
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产品属性
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英文名细胞凋亡坏死检测
数量100
供应商上海三抒生物科技有限公司
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规格100次
产品说明
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中性红细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒(Neutral Red Cell Proliferation and Cytotoxicology Assay Kit)是一种基于细胞对于中性红的摄入能力来检测细胞增殖或细胞毒性的试剂盒。
中性红可以被活细胞所摄入,并在溶酶体中积累。在细胞增殖加快时,细胞数量增多,可以摄入的中性红的量就会增加。在细胞受到损伤时,中性红的摄入能力会下降。这样通过对于中性红摄入量的不同就可以确定细胞的增殖或毒性情况。
中性红同时也是一种pH指示剂,在酸性时呈红色,在pH6.8升至pH8.0时由红色逐渐转变为黄色。细胞核中的核酸呈酸性,因此细胞核会被染成红色。由于溶酶体(lysome)中也是酸性环境,因此溶酶体也可以被中性红染色液染成红色。
中性红的分子式为C15H17IN4,分子量为288.8,CAS Number为553-24-2。
本试剂盒可以用于检测500个样品。
包装清单:

乳酸脱氢酶细胞毒性检测试剂盒(LDH Cytotoxicity Assay Kit),也称乳酸脱氢酶检测试剂盒(LDH Assay Kit)或乳酸脱氢酶释放检测试剂盒(LDH Release Assay Kit),是一种基于diaphorase催化的INT显色反应,通过比色法检测细胞毒性时释放的乳酸 脱氢酶活性或检测其它样品中的乳酸脱氢酶活性的试剂盒。
本试剂盒可以用于常规的乳酸脱氢酶活性的检测,更常用于以LDH释放为指标的细胞毒性检测。同时,基于细胞总乳酸脱氢酶活性的检测,本试剂盒也可以用于检测细胞增殖和细胞毒性检测。
细胞凋亡或坏死而造成的细胞膜结构的破坏会导致细胞浆内的酶释放到培养液里,其中包括酶活性较为稳定的乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase, LDH)。通过检测从质膜破裂的细胞中释放到培养液中的LDH的活性,就可以实现对细胞毒性的定量分析。LDH释放被看做细胞膜完整性的重要指标,并被广泛用于细胞毒性检测。LDH释放被认为是以前使用放射性的51Cr标记细胞,随后通过51Cr释放进行 细胞膜完整性检测的安全有效的替代方法。
本试剂盒的基本原理是,在乳酸脱氢酶的作用下,NAD+被还原生成NADH,NADH和INT (2-p-iodophenyl-3-
nitrophenyl tetrazolium chloride)被硫辛酰胺脱氢酶(diaphorase)催化反应生成NAD+和强生色物甲臜(formazan),在490nm波长下产生吸收峰,从而可以通过比色来定量乳酸脱氢酶的活性。吸光度与乳酸脱氢酶活性成线性正相关。该酶联反应原理的示意图如下:

可检测细胞培养液、细胞裂解液等样品中乳酸脱氢酶的活性。一个试剂盒可进行100次检测。
包装清单:

产品编号产品名称包装
C0016-1LDH释放试剂1.5ml
C0016-2乳酸溶液2ml
C0016-3酶溶液1ml×2
C0016-4INT溶液(10X)0.2ml
C0016-5INT稀释液2ml
说明书1份

保存条件:
-20℃保存,一年有效。C0016-3需注意避免反复冻融。C0016-4需避光保存。试剂盒解冻后可以短期4℃存放,2-3天内有效。
注意事项:
冷冻会使样品中部分乳酸脱氢酶失活,4℃可放置2-3天。建议样品准备好后尽量当天完成测定。
如果检测细胞培养液中的乳酸脱氢酶,由于血清含有乳酸脱氢酶,建议血清的使用浓度不要超过1%,并最好使用热灭活血清。如果一定需要使用10%血清,在检 测时一定要设置没有细胞,但加入了相同体积培养液的对照孔,以用于消除背景。
细胞过度生长、密度过高、离心速度过大、培养箱内外温差过大,都会造成细胞释放乳酸脱氢酶增加。
如果希望进行乳酸脱氢酶活性的绝对定量,用户需自备乳酸脱氢酶标准品。
本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。 
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

保存条件:
-20℃保存,一年有效。中性红染色液需避光保存。
注意事项:
需准备一台可以测定A540的酶标仪或微量分光光度计。
第一次使用本试剂盒时建议先取少量样品做好预实验。
本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

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